穩轉細胞株構建服務
穩轉細胞株構建是指外源基因進入受體細胞并整合到細胞的染色體上,使目的抗原在宿主細胞膜表面進行長期穩定的表達。穩轉細胞株在生物學研究中扮演著非常重要的角色,廣泛用于重組蛋白和單克隆抗體生產、藥物篩選、基因功能研究等應用。
華美生物多年從事蛋白表達研究,具有大量穩轉細胞株開發經驗,能夠有效提高穩轉細胞株的生產能力,改善實驗結果,為客戶提供過表達穩轉細胞株和報告基因細胞株的從基因序列到穩轉株交付的一站式服務。
指基于某一細胞系構建的持續過表達或干擾某特定基因的細胞系,其特性在于它們能夠持續地表達特定的基因,而不是像瞬時轉染那樣只能短暫地表達。
應用領域:
- 基因功能研究
- 藥物篩選
- 疾病模型建立
- 小分子藥物和抗體藥開發
通過分子生物學克隆技術,將特定的報告基因(例如熒光素酶)插入到目標細胞的染色體中,經過篩選培養,獲得能夠穩定表達報告基因的細胞株。
應用領域:
- 基因表達調控研究
- ADCC/ADCP功能驗證
- 蛋白質相互作用(信號通路)研究
- Cross-linking藥物評價
服務優勢:
完善的服務平臺
具備完善的細胞、抗體、蛋白等服務平臺,能夠提供從穩轉細胞株構建到重組蛋白生產等一站式技術服務
嚴格的質控體系
雙重檢測細菌、支原體等微生物,100%確保無污染;進行細胞活率檢測,保證交付質量
穩定傳代
高質量交付標準,保證穩定性傳代>20代
專業技術支持
專業技術人員定期匯報項目進展,以保證項目順利推進
技術路線:

服務內容及周期:
宿主細胞檢測(1-2周)
- 細胞存活率檢測;
- 細胞數量檢測;
- 細菌真菌檢測;
- 支原體檢測。
慢病毒表達質粒構建(2-3周)
- 密碼子優化;
- 全基因合成;
- 構建慢病毒表達質粒。
慢病毒包裝(1-2周)
- 將表達質粒和輔助質粒共轉宿主細胞,進行慢病毒包裝。
Cell Pool篩選及驗證(1-2周)
- 陽性細胞篩選;
- Cell pool表達量檢測。
單克隆篩選及驗證(2-3周)
- 單細胞進行鋪板,并驗證單克隆的表達。
細胞株質控(1-2周)
- 單克隆擴大培養,凍存;
- 復蘇存活率檢測;
- 細菌真菌及支原體檢測。
宿主細胞檢測(1-2周)
- 細胞存活率檢測;
- 細胞數量檢測;
- 細菌真菌檢測;
- 支原體檢測。
報告基因表達質粒構建(2-3周)
- 密碼子優化;
- 全基因合成;
- 構建慢病毒表達質粒。
瞬時轉染細胞(1-2周)
- 構建好的報告基因表達質粒瞬轉細胞。
Cell pool 篩選及功能活性驗證(1-2周)
- 陽性細胞篩選;
- Cell pool表達量檢測;
- 藥物誘導檢測信號通路。
單克隆篩選及驗證(7-10周)
- 單細胞進行鋪板,并驗證單克隆的表達。
細胞株質控(1-2周)
- 單克隆擴大培養,凍存;
- 復蘇存活率檢測;
- 細菌真菌及支原體檢測。
客戶提供:
所需細胞株的靶點及宿主細胞信息
最終交付:
① Pool細胞或者單克隆細胞;
② 質檢報告(COA)及項目結題報告。