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不容錯(cuò)過的標(biāo)簽抗體!

日期:2018-11-22 13:46:05

標(biāo)簽抗體(Tag Antibody)


      標(biāo)簽抗體,別名為抗原表位,又稱抗原決定簇,是抗原分子中決定抗原特異性的特殊區(qū)域或基團(tuán),是與抗體特異性結(jié)合的結(jié)構(gòu)或序列。隨著生物技術(shù)的發(fā)展,科研人員可以通過DNA重組技術(shù),構(gòu)建包含目的基因以及表位標(biāo)記的融合蛋白,進(jìn)而通過特異性標(biāo)簽抗體對(duì)其鑒定與純化,以達(dá)到研究的需求。

      隨著生物技術(shù)的發(fā)展,研究人員常利用DNA重組技術(shù)構(gòu)建包含目的基因以及表位標(biāo)記的融合蛋白,進(jìn)而通過特異性標(biāo)簽抗體對(duì)其鑒定與純化,以達(dá)到研究的需求;同時(shí)利用重組雜合體中含有一個(gè)多肽融合單體(親和標(biāo)簽)這一特性,其也被廣泛用于輔助目標(biāo)蛋白的純化。總之標(biāo)簽抗體是開展基因蛋白表達(dá)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和基因功能研究的常用工具。

      標(biāo)簽抗體(Tag Antibody)可用于檢測(cè)和純化各種商品化表達(dá)載體上的標(biāo)簽序列,籍以分析檢目的蛋白的表達(dá)含量及其功能。其原理是抗原—抗體反應(yīng),這些標(biāo)簽抗體可以高度特異地結(jié)合對(duì)應(yīng)的標(biāo)簽融合蛋白。

      常用標(biāo)簽包括:Flag、Myc、HA、His、GST、MBP等。

      Flag標(biāo)簽系統(tǒng)利用一個(gè)短的親水性八氨基酸肽(DYKDDDDK)融合到目標(biāo)蛋白;其純化條件是非變性的,因此可以純化所有有活性的融合蛋白。

      Myc標(biāo)簽(序列為:EQKLISEEDL)已成功應(yīng)用于WB雜交技術(shù)、免疫沉淀IP和流式細(xì)胞術(shù)中。因此可用于檢測(cè)重組蛋白在細(xì)菌、酵母、昆蟲細(xì)胞和哺乳細(xì)胞中的表達(dá)情況。Myc重組蛋白質(zhì)可通過偶聯(lián)Myc標(biāo)簽抗體到二乙烯砜活化的瓊脂糖上而進(jìn)行親和純化。但Myc重組蛋白的低pH洗脫條件往往會(huì)降低蛋白質(zhì)的活力,因此Myc標(biāo)簽系統(tǒng)廣泛應(yīng)用于檢測(cè)但很少用于純化。

      HA標(biāo)簽系統(tǒng)利用一個(gè)HA(influenza hemagglutintin epitope:YPYDVPDYA)短肽融合到目標(biāo)蛋白。HA標(biāo)簽可位于蛋白質(zhì)的C端或N端,該系統(tǒng)已廣泛應(yīng)用于多種細(xì)胞類型,相應(yīng)的HA標(biāo)簽抗體也被廣泛運(yùn)用。

      His標(biāo)簽是由6個(gè)組氨酸(His-His-His-His-His-His)組成的短肽,專門設(shè)計(jì)用于重組蛋白的吸附純化。由于分子量小,且較容易分離和純化,是目前使用最廣泛的一種。

      GST標(biāo)簽體系具有蛋白表達(dá)率高,表達(dá)產(chǎn)物純化方便,利于GST抗體制備的特點(diǎn)。GST融合蛋白在水溶液中可溶,可從細(xì)菌裂解液中提取,在不變性的條件下通過親和層析得到。

      MBP(麥芽糖結(jié)合蛋白)標(biāo)簽蛋白大小為40kDa,由大腸桿菌K12的malE基因編碼。MBP可增加在細(xì)菌中過量表達(dá)的融合蛋白的溶解性,尤其是真核蛋白。如果蛋白在細(xì)菌中表達(dá),MBP可以融合在蛋白的N端或C端。可用MBP抗體或表達(dá)的目的蛋白特異性抗體檢測(cè)MBP標(biāo)簽標(biāo)記的重組蛋白。
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華美標(biāo)簽抗體特別推薦

貨號(hào):CSB-MA000041M0m
種屬反應(yīng)性:All
免疫原:EQKLISEEDL (Myc) synthetic peptide conjugate to KLH
應(yīng)用范圍:ELISA, WB, IF, IP
引用文獻(xiàn):The double-edged sword of endoplasmic reticulum stress in uremic sarcopenia through myogenesis perturbation , Jheng JR,et al. J Cachexia Sarcopenia Muscle,Jan 29(IF=12.511)

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