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無(wú)標(biāo)簽蛋白純化的技術(shù)挑戰(zhàn)與解決方案?

日期:2025-05-16 14:05:12

    挑戰(zhàn):缺乏特異性結(jié)合標(biāo)簽,依賴蛋白天然特性(如電荷、疏水基團(tuán)、配體結(jié)合能力)。
    解決方案:
    免疫親和層析:利用特異性抗體(如 Anti-Flag 抗體偶聯(lián)磁珠),適用于已知表位的蛋白。
    金屬螯合層析:利用蛋白表面天然組氨酸簇(如天然 His-rich 區(qū)域),需預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證結(jié)合力。
    共價(jià)層析:通過(guò)巰基 - 二硫鍵交換捕獲含半胱氨酸的蛋白(如硫氧還蛋白)。
    關(guān)鍵:標(biāo)簽切除酶(如 TEV 蛋白酶)需通過(guò) SEC 去除,殘留量<0.05%。