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蛋白純化的最高純度能達到多少,怎么驗證?

日期:2025-05-16 14:03:29

純度標(biāo)準(zhǔn):
    常規(guī)純化:≥95%(SDS-PAGE 考馬斯亮藍染色)。
    高純度需求:≥98%(HPLC-SEC 檢測,雜質(zhì)峰面積<2%)。
 
技術(shù)組合:
    親和層析(His/Strep 標(biāo)簽):一步純化至 80-90% 純度。
    離子交換層析(IEX):去除電荷差異雜質(zhì)(如核酸、內(nèi)毒素)。
    凝膠過濾層析(SEC):分離聚集體,同時分析分子量(如抗體單體純度>99%)。
    驗證手段:LC-MS/MS 鑒定肽段覆蓋率,內(nèi)毒素檢測(LAL 法,<0.1 EU/μg)。