外泌體分離純化方法
日期:2023-07-12 14:46:51
外泌體分離和純化是研究細胞間通訊和外泌體中包含的生物活性物質的重要步驟。以下是幾種常用的外泌體分離和純化方法:
超速離心法:這是最常用的外泌體分離方法之一。通過多次離心步驟,可以去除細胞碎片和大部分的蛋白質,從而得到較為純凈的外泌體。
尺寸排除色譜法(SEC):該方法基于外泌體和其他細胞成分的大小差異。利用尺寸排除柱,可以將外泌體從其他大分子物質如蛋白質和核酸分離開來。
密度梯度離心法:這種方法利用不同密度的梯度介質(如蔗糖或乙二醇)來分離外泌體。離心過程中,外泌體會在不同密度梯度之間沉降到特定位置,從而實現分離。
免疫親和法:根據表面標記的蛋白質,利用特定的抗體或親和劑進行捕獲和純化外泌體。例如,可以利用與外泌體表面標志物CD63或CD9等結合的抗體進行分離。
過濾法:通過使用不同孔徑的濾膜,可以將細胞碎片和大顆粒物質過濾掉,從而得到較為純凈的外泌體。
以上方法可能需要結合使用來獲得更好的外泌體純度和得率。此外,在分離和純化過程中,研究者還需要采取相應的質量控制措施,如使用特定的標準驗證外泌體的存在和純度。
上一篇: 畢赤酵母表達載體鏈接與構建原理
下一篇: 血液中紅細胞外泌體分離原理