tricine膠中夾層膠的作用
日期:2023-06-20 16:23:23
在蛋白質電泳分離中,tricine SDS-PAGE技術是一種常用的方法,其膠體系包括膠上液體、膠下液體和夾層膠。夾層膠是指位于兩層SDS膠液層之間的一層特殊膠液,其主要作用是調控樣品走形、改善分辨率,提高蛋白質電泳分離的準確度和靈敏度。
夾層膠通常由三種化學物質組成:tricine、bis-tris和檸檬酸。tricine是一種緩沖劑,可保持膠環境的穩定性,使分離的蛋白質能得到有效的緩沖作用;bis-tris是一種弱酸基緩沖劑,在酸性pH下具有良好的緩沖效果,可以維持膠的穩定性;檸檬酸是一種類似EDTA的絡合劑,可以與金屬離子配對并穩定樣品,避免樣品降解。
夾層膠的作用主要有以下幾點:
1、調整樣品走形
使用夾層膠可以協助樣品保持在SDS膠液層之間,防止樣品產生偏移或“漂移”現象,從而使分離的蛋白質能夠更準確、均勻地沉淀在SDS膠液層中。這種方法可使樣品與附近的蛋白質分離開來,使電泳分離更加精確。
2、改善分辨率
夾層膠可以縮小樣品帶的寬度,減少帶之間的重疊和混疊,提高分辨率和檢測效果。樣品與較大的蛋白質分子相結合時,它們可能會難以分離,并且可能需要更長時間來達到完全分離。夾層膠可以增加分離樣品的長度,導致更好的分離,同時還可減少較大蛋白質與載體蛋白質之間的交錯。
3、提高靈敏度
使用夾層膠可以增強少量樣品的分離效果,提高電泳分離的靈敏度。其緩沖劑和絡合劑成分可優化樣品的條件,從而使分離效果更加優良,進一步加強對低濃度蛋白的檢測。
夾層膠在tricine SDS-PAGE技術中具有非常重要的作用,它可以調整樣品走形、改善分辨率、提高靈敏度等,這有助于提高蛋白質電泳分離的準確度和靈敏度,為后續的蛋白質分析工作提供了良好的基礎。
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