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常見的抗體標記方法有哪些?各有什么特點?

日期:2025-06-04 14:52:56

1、熒光標記:
    特點:具有高靈敏度和直觀性,可通過熒光顯微鏡、流式細胞儀等設備進行檢測,還能實現多重標記(使用不同顏色的熒光染料)。
    常用染料:FITC(綠色)、Cy3/Cy5(紅色 / 遠紅外)、Alexa Fluor 488/647 等。
    應用場景:適用于細胞成像、流式細胞術以及熒光共振能量轉移(FRET)實驗。
 
2、酶標記:
    特點:通過酶催化底物顯色(如 DAB 顯色呈棕色),可進行定性或半定量檢測,成本較低,但需要注意底物的穩定性。
    常用酶:辣根過氧化物酶(HRP)、堿性磷酸酶(AP)。
    應用場景:主要用于 ELISA、Western blot 和免疫組化(IHC)。
 
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3、生物素標記:
    特點:生物素與鏈霉親和素具有極高的親和力(Kd≈10?¹? M),可用于信號放大,例如在 ELISA 中構建 “生物素 - 親和素” 體系。
    應用場景:適用于多重檢測、芯片技術以及磁珠分離等領域。
 
4、同位素標記:
    特點:具有極高的靈敏度(可檢測到皮克級水平),但存在放射性安全問題,且需要專業設備(如 γ 計數器)。
    常用同位素:¹²?I、³H。
    應用場景:主要用于放射免疫分析(RIA)和受體結合實驗。
 
5、納米顆粒標記:
        特點:金納米顆粒標記的抗體可通過電子顯微鏡觀察(呈現電子致密顆粒),在免疫電鏡中較為常用;磁性納米顆粒則可用于細胞分選或磁靶向治療。

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