快速制備單克隆抗體的方法
日期:2023-05-17 14:53:38
單克隆抗體mAb(Monoclonal Antibody)是針對特定抗原的單一克隆抗體,其制備需要經過多個步驟。隨著技術的發展,單克隆抗體制備方法也越來越多樣化和高效化。以下是幾種可供選擇的快速制備單克隆抗體的方法:
免疫細胞篩選法Immune Cell Screening
免疫細胞篩選法是利用抗原處理免疫細胞后,在高通量顯微鏡下觀察細胞的反應和特征,篩選出目標細胞并進行單細胞分離,最終獲得單克隆抗體。該方法操作簡便、高通量、快速,且適用于大規模篩選。
單細胞擴增法Single Cell Amplification
單細胞擴增法需要將免疫細胞通過多次限制性稀釋和培養,使每個細胞獨立生長形成單個克隆細胞,然后從單個細胞中收獲單克隆抗體。該方法需要較長時間,并且可能存在細胞生長性差異導致的偏差。但該方法能獲得高質量的單克隆抗體且適用范圍更廣。
基因組DNA篩選法Genomic DNA Screening
基因組DNA篩選法是先通過PCR擴增出免疫細胞基因組中的重鏈和輕鏈基因,然后進行克隆限制性酶切和測序分析,最終篩選出合適的克隆。該方法易于操作、成本低且適用于多種物種。但獲得的克隆數量較少且存在突變等不確定因素。
親和層析法Affinity Chromatography
親和層析法依靠目標抗原與抗體的親和力,將懸浮液中的抗體通過某種化學或物理方式吸附到親和樹脂上,再經洗脫、純化和檢測等步驟,最終獲得單克隆抗體。該方法適用于大規模生產且可以同時獲得多種克隆抗體,但需要特定的親和樹脂和條件,并且可能會因親和力不足而導致重要抗原無法被識別的問題。
以上四種方法都有各自的優勢和局限性,具體應根據實驗需要和條件選擇合適的方法進行單克隆抗體的制備。
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