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四大酵母培養(yǎng)基的配置

日期:2010-09-06 11:26:18

一、目的要求

了解合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基的配制原理。
  學(xué)習(xí)和掌握麥芽汁培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基、豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基和察氏培養(yǎng)基的配制方法。

二、基本原理 

麥芽汁培養(yǎng)基和馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基被廣泛用于培養(yǎng)酵母菌和霉菌。馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基有時(shí)也可用于培養(yǎng)放線菌。豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基也是培養(yǎng)酵母菌及霉菌的一種優(yōu)良培養(yǎng)基。察氏培養(yǎng)基主要用于培養(yǎng)霉菌觀察形態(tài)用。麥芽汁培養(yǎng)基為天然培養(yǎng)基,馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基和豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基二者均為半合成培養(yǎng)基,而察氏培養(yǎng)基則為合成培養(yǎng)基。培養(yǎng)基配方中出現(xiàn)的自然pH系指培養(yǎng)基不經(jīng)酸、堿調(diào)節(jié)而自然呈現(xiàn)的pH。 

三、實(shí)驗(yàn)材料 

(一)  藥品  
葡萄搪、蔗糖、NaN03、K2HP04、KCl、MgSO4·7H2O,F(xiàn)eS04、瓊脂。 
  (二)  儀器  
天平、高壓蒸汽滅菌鍋。  
  (三)  玻璃器皿  
移液管、試管、錐形瓶、燒杯、量筒、培養(yǎng)皿、玻璃漏斗等。  
  (四)  其他物品  
藥匙、pH試紙、稱量紙、記號筆、棉花、紗布、線繩、塑料試管蓋、牛皮紙、報(bào)紙、新鮮麥芽汁、黃豆芽、馬鈴薯等。

四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 

(一)  麥芽汁培養(yǎng)基的配制 

1.培養(yǎng)基成分  
新鮮麥芽汁一般為10-15波林。 

2.配制方法   

(1)  用水將大麥或小麥洗凈,用水浸泡6-12h,置于15℃陰涼處發(fā)芽,上蓋紗布,每日早、中、晚淋水一次,待麥芽伸長至麥粒的兩倍時(shí),讓其停止發(fā)芽,曬干或烘干,研磨成麥芽粉,貯存?zhèn)溆谩?nbsp;  
  (2)  取一份麥芽粉加四份水,在65℃水浴鍋中保溫3-4h,使其自行糖化,直至糖化完全(檢查方法是取0.5ml的糖化液,加2滴碘液,如無藍(lán)色出現(xiàn),即表示糖化完全)。   
  (3)  糖化液用4-6層紗布過濾,濾液如仍混濁,可用雞蛋清澄清(用一個(gè)雞蛋清,加水20 ml,調(diào)勻至生泡沫,倒入糖化液中,攪拌煮沸,再過濾)。   
  (4)  用波美比重計(jì)檢測糖化液中糖濃度,將濾液用水稀釋到10-15波林,調(diào)pH至6.4。如當(dāng)?shù)赜衅【茝S,可用未經(jīng)發(fā)酵,未加酒花的新鮮麥芽汁,加水稀釋到10-15波林后使用。   
  (5)  如配固體麥芽汁培養(yǎng)基時(shí),加入2%瓊脂,加熱融化,補(bǔ)充失水。   
  (6)  分裝、加塞、包扎。   
  (7)  高壓蒸汽滅菌  100 Pa滅菌20 min。 

(二)  馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基的配制

1.培養(yǎng)基成分  
  馬鈴薯   20g  
  葡萄糖   2 g  
  瓊脂    1.5-2g  
  水     100ml  
  自然pH

  2.配制方法
  (1)  配制20%馬鈴薯浸汁  取去皮馬鈴薯200g,切成小塊,加水1000ml。80℃浸泡lh,用紗布過濾,然后補(bǔ)足失水至所需體積。100 Pa滅菌20 min。即成20%馬鈴薯浸汁,貯存?zhèn)溆谩?nbsp;  
  (2)  配制時(shí),按每100 ml馬鈴薯浸汁加入2g葡萄糖,加熱煮沸后加入2g瓊脂,繼續(xù)加熱融化并補(bǔ)足失水。   
  (3)  分裝、加塞、包扎。   
  (4)  高壓蒸汽滅菌  100 Pa滅菌20 min。

 (三)豆芽汁葡萄糟培養(yǎng)基的配制  

1.培養(yǎng)基成分   
  黃豆芽   10g  
  葡萄糖   5g  
  瓊脂    1.5-2g  
  水     100ml  
  自然pH 
 
  2.配制方法
  (1)  稱新鮮黃豆芽10g,置于燒杯中,再加入100 ml水,小火煮沸30 min,用紗布過濾,補(bǔ)足失水,即制成10%豆芽汁。  
  (2)  配制時(shí),按每100 ml10%豆芽汁加入5g葡萄糖,煮沸后加入2 g瓊脂,繼續(xù)加熱融化,補(bǔ)足失水。   
  (3)  分裝、加塞、包扎。   
  (4)  高壓蒸汽滅菌  100 Pa滅菌20 min。

(四)察氏(czapck)培養(yǎng)基的配制

1.培養(yǎng)基成分  
  蔗糖       3g  
  NaN03     0.3g  
  K2HP0    0.1g  
  KCl        0.05g  
  MgSO4·7H2O     0.05 g  
  FeS0     0.001 g  
  瓊脂      1.5-2g  
  蒸餾水     100ml  
  自然pH    
 
  2.配制方法
  (1)  稱量及溶化  量取所需水量約2/3左右加入到燒杯中,分別稱取蔗糖、NaNO3 、K2HP04 、KCl、MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每100 ml培養(yǎng)基加入1ml 0.1%的FeS04溶液。  
  (2)  定容  候藥品全部溶解后,將溶液倒入量筒中,加水至所需體積。  
  (3)  加瓊脂  加入所需量瓊脂,加熱融化,補(bǔ)足失水。  
  (4)  分裝、加塞、包扎。  
  (5)  高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min。

五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容 

記錄你所配制培養(yǎng)基的名稱及成分。


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