體液免疫功能的檢測
日期:2010-07-30 14:55:56
一、補體測定
1、血清總補體活性測定
當兔抗羊紅細胞血清與羊紅細胞結合后,遇到補體即可使羊紅細胞發生溶血,依據這一特點可建立測定血清中總補體活性的方法。
當血清的效價和綿羊紅細胞濃度保持一定的情況下,在規定的反應溫度和時間內,溶血程度與補體量呈正相關。因此,通過測定溶血程度,即可測知補體的含量。目前常用的方法是用 50%補體溶血試驗(CH30)測定總補體活性,即求出使50%致敏羊紅細胞發生溶血時的血清最小用量。以CH50單位/ml表示。
2、補體旁路途徑活性測定
用于人和動物血清補體旁路途徑活性的測定,其依據是未致敏的家兔紅細胞可以激活B因子,引起補體旁路途徑活化,導致兔紅細胞溶解。此法是將一定濃度和容積的新鮮家兔紅細胞懸液與不同量的待檢血清混合,作用一定時間后觀察溶血反應。根據引起50%溶血所需的最小補體量,計算出待檢血清補體旁路途徑的活性,以ACH50單位/ml表示。
3、補體組分測定
目前已能對所有的補體組分進行提純、鑒定和制備相應的特異性抗體,并對多種補體組分及其裂解產物進行定量測定。常用的方法是單向免疫擴散(SRID)或火箭電泳法。現已建立更為靈敏、快速的免疫比濁法、酶聯免疫吸附試驗(ELISA)及放射免疫測定(RIA)等方法。
二、免疫球蛋白測定
1、用已知抗原檢測相應抗體,如各種感染性疾病的輔助診斷和流行病學調查等。
2、通過免疫動物或單克隆抗體技術制備特異抗體,對Ig進行定性或定量測定,以及用于與Ig異常的有關疾病的診斷,如免疫缺陷或免疫增生病。
三、免疫復合物檢測
1、組織內的IC檢查
對于組織中沉積的IC的檢查,常用的方法是將待檢組織切片以熒光素、酶或全溶膠標記的抗體進行免疫組化染色后鏡檢。通常是用標記的抗球蛋白抗體或抗C3抗體檢查IC中的Ig或補體成分。
2、體液中循環IC檢查
(1)抗原特異性方法 通過區別游離的抗原和與抗體結合的抗原,選擇性測定含有某種特定抗原的IC;在疑為由某種抗原引起免疫病理反應的特定疾病時,可用此類方法分析IC中的抗原成分。較為常用的方法是先用PEG沉淀檢品中IC,再與吸附特異性抗體的富含A蛋白的葡萄球菌(SAC)作協同凝集試驗進行抗原檢測。或用特異性抗體包被固相載體,吸附檢品中IC分子上的抗原,用ELISA法進行測定,但應同時設已知陽性對照。
(2)抗原非特異性方法 此法不考慮形成IC的抗原物質,并且檢測方法多種,如:物理方法,分子受體法,細胞受體法。
四、細胞因子檢測
常用的細胞因子檢測方法有兩類,即生物學活性檢測法、免疫學檢測法。
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