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iPS技術重大突破:治療級誘導多能干細胞

日期:2014-09-05 09:15:22

 

誘導多能干細胞iPSCs)即將成體細胞重編程,令其恢復到胚胎干細胞的狀態,這種細胞在治療方面具有極大的潛力,如可以治療受損神經,再生肢體和器官,以及為患者特殊疾病提高完美的模型。但是通過目前的重編程過程得到的細胞會出現嚴重的遺傳和表觀遺傳異常,這些異常降低了細胞的質量,也限制了它們在臨床上的治療用途。

 

2006年首次報道iPSCs技術的時候,科學家們指出重編程效率十分關鍵,因為只有一小部分重編程細胞能成功轉化為細胞系。因此,在干細胞研究領域,許多科學家們開始聚焦于重編程效率研究,希望能增加細胞系數量,但是隨著越來越多重編程過程被破解,科學家們發現這其中依然存在許多可變變量,比如重編程因子比例,重編程環境等,這些都會極大的影響細胞的質量。

 

最近,一組來自Whitehead研究院的研究人員與來自希伯來大學的研究人員合作,解析了重編程因子本身對于重編程效率和細胞質量的影響,這一研究成果公布在Cell Stem Cell雜志上。

 

“博士后研究員Yosef BuganimStyliani Markoulaki等人發現了一個不同以往的組合重編程因子的方法,雖然重編程效率會降低,但是得到的細胞質量極大提升,”文章作者,麻省理工生物學教授Rudolf Jaenisch說,“細胞質量也是一個非常重要的問題。在這一點上,從一萬個細胞中得到一個克隆,和從十萬個細胞中得到一個克隆沒有區別,只要它的質量高。”

 

為了構建iPSCs,科學家們首先給成體細胞加入胚胎干細胞中取得的混合基因,然后iPSCs就能分化成幾乎任何一種細胞類型,比如神經細胞、肝臟細胞或肌肉細胞。

 

雖然最初的配方:Oct4Sox2klf4MycOSKM)能有效的進行細胞重編程,但是這樣得到的細胞具有嚴重的基因畸變,包括非整倍體和8號染色體三體,因此不適合用于臨床研究。

 

因此Buganim Markoulaki嘗試利用生物信息學分析重編程過程中關鍵的48個基因,結果他們設計出了一種新型的基因組合:Sall4, Nanog, Esrrb, and Lin28 (SNEL)

 

通過這種SNEL方法,研究人員能得到大約80%的高質量小鼠細胞克隆,并且這些細胞也通過目前最嚴格的多能檢測測試:四倍體互補分析tetraploid complementation assay,生物通譯)。而對此相比,OSKM方法只能得到20-30%的高品質通過檢測的細胞。

 

Buganim認為SNEL重編程之所以質量更好的原因在于,這種混合配方不是依賴于潛在致癌基因Myc,這種基因會引起許多遺傳問題。而且更重要的是,這種混合配方也不依賴于潛在的主調控因子Oct4Sox2,這兩個基因有時會異常激活成體細胞基因組中某些區域。

 

為了更好的理解為何一些重編程細胞質量高,而另外一些則質量低,Buganim Markoulaki又在遺傳和表觀遺傳水平上分析了SNEL克隆。研究人員發現SNEL細胞DNA的組蛋白H2AX積累位置,與胚胎干細胞中位置十分相似,而且H2AX的位置似乎也預示著細胞的質量。研究人員相信這種特質能用于高質量克隆快速篩選。

 

但是就目前的SNEL細胞來說,還不能用于人類細胞重編程,因為人類細胞要比小鼠細胞更難以操控。

 

“我們知道SNEL并不是理想的重編程因子組合,” Buganim說,“這項工作只是從理論上證明我們能發現理想的組合,SNEL的發現表明通過生物信息學工具,我們能得到更好質量的細胞。現在我們就能進一步尋找優化的組合,并在人類細胞中進行實驗。”

 


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