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Nature Methods:信號傳導研究的有力工具

日期:2014-03-26 08:56:07

 

多倫多大學的研究人員在酵母雙雜交系統的基礎上,開發了研究哺乳動物膜蛋白互作的新技術,為科學家們提供了研究人類蛋白互作的更好途徑。膜蛋白的相互作用是機體健康和疾病發展中的關鍵過程。

 

信號傳導對于細胞正常功能和疾病發展都很重要,這一過程由細胞內的大量膜蛋白介導,這些蛋白能根據外界刺激發生相應的改變。在人類的身體中,基本上三分之一的蛋白都是膜蛋白。據統計,這些蛋白的功能障礙與超過五百種疾病有關。然而,要研究這些蛋白的作用機制并不容易,因為理解它們的實際功能,依賴于分析膜蛋白與其它蛋白的互作情況。

 

“我們的新技術,可以在人類細胞的天然環境中檢測膜蛋白發生的相互作用,”多倫多大學的Igor Stagljar教授說。“同時,這一技術還可以靈敏的檢測到藥物介入引起的微小變化,在藥物研發領域有著廣闊的應用前景,特別是癌癥和神經學疾病方面。”

 

酵母雙雜交系統是在酵母體內分析蛋白質相互作用的常用遺傳學方法。Stagljar及其研究團隊花了四年時間,在酵母雙雜交系統的基礎上,開發了哺乳動物膜雙雜交技術MaMTHMammalian-Membrane Two-Hybrid assay)。MaMTH技術可以檢測人類細胞中的膜蛋白相互作用,主要針對依賴刺激物和磷酸化的膜蛋白互作。這一研究于三月二十三日發表在Nature Methods雜志的網站上。

 

非小細胞肺癌是目前最常見的一種肺癌,研究人員利用MaMTH技術對這種疾病中的蛋白互作進行了研究。表皮生長因子受體EGFR發生突變,會引起癌細胞增殖,目前已經有一些已批準和正在研發的抗癌藥物將其作為治療靶標。

 

研究人員利用MaMTH進行篩選,發現CRKII可以與致癌的突變EGFR相互作用,促使非小細胞肺癌中的異常信號傳遞持續激活。

 

CRKII很可能調控著突變EGFR的穩定性,并通過促進癌細胞信號傳遞,推動癌癥的發展,”文章的第一作者Julia Petschnigg說。“我們研究后發現,通過聯合化療將突變受體和CRKII的抑制結合起來,對于治療肺癌有很大的幫助。”

 

研究人員指出,MaMTH是一個有力的新工具,可以為人們展示人類膜蛋白的動態互作組。下一步,他們將把這一技術應用于其他人類疾病中的一些突變蛋白。

 


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