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更安全的干細(xì)胞培養(yǎng)新方法

日期:2015-02-28 09:02:03

 人類多能干細(xì)胞hPSCs)的自我更新和分化能力,使其成為細(xì)胞移植療法、藥物開發(fā)、細(xì)胞分化和發(fā)育研究的一種很有前途的材料來源。然而,這些應(yīng)用所必需的大量細(xì)胞,需要hPSC培養(yǎng)物的大量擴(kuò)增,這個(gè)過程與遺傳學(xué)和表觀遺傳學(xué)變化有關(guān)。延伸閱讀:2014最受歡迎的細(xì)胞培養(yǎng)/分析文章。

 

最近,斯克里普斯研究所(TSRI)和加州大學(xué)(UC)圣迭戈醫(yī)學(xué)院的研究人員帶領(lǐng)的一項(xiàng)新研究表明,某些特定干細(xì)胞培養(yǎng)方法與DNA突變增加有關(guān)。這項(xiàng)研究為研究人員指出了更安全和更可靠的干細(xì)胞培養(yǎng)方法,來治療疾病和損傷。

 

本文資深作者、TSRI發(fā)育神經(jīng)生物學(xué)教授Jeanne LoringUC圣迭哥醫(yī)學(xué)院助理教授Louise Laurent說:“這關(guān)乎質(zhì)量控制;我們確保這些細(xì)胞是安全有效的。”

 

Laurent補(bǔ)充說:“用來保持和擴(kuò)增干細(xì)胞培養(yǎng)物(用于細(xì)胞替代療法)的過程需要改進(jìn),由此產(chǎn)生的細(xì)胞在使用前需要仔細(xì)測(cè)試。”

 

相關(guān)研究結(jié)果發(fā)表在二月二十五日的PLOS ONE雜志。

 

培養(yǎng)干細(xì)胞

 

因?yàn)槿烁杉?xì)胞——稱為“多能性干細(xì)胞”,可以分化成多種類型的細(xì)胞,所以它們可能是逆轉(zhuǎn)退化性疾病(如帕金森氏病)或修復(fù)受損組織(如心臟病發(fā)作后的心臟肌肉)的關(guān)鍵。干細(xì)胞在體內(nèi)是相對(duì)罕見的,然而,研究人員必須在培養(yǎng)基中培養(yǎng)它們。

 

而所有細(xì)胞在分裂時(shí)都有突變的風(fēng)險(xiǎn),Loring和她同事以前的研究表明,干細(xì)胞的培養(yǎng)可以選擇有利于更快細(xì)胞生長(zhǎng)和有時(shí)與腫瘤相關(guān)的突變。

 

該論文第一作者、Loring實(shí)驗(yàn)室博士后研究員Ibon garitaonandia說:“大多數(shù)的變化不會(huì)影響用于治療的細(xì)胞的安全性,但是我們需要監(jiān)控培養(yǎng)物,這樣我們就知道發(fā)生了什么樣的變化。”

 

如何減少突變

 

新的研究顯示,一定的培養(yǎng)條件可以減少突變。

 

Loring和她的同事測(cè)試了不同的基質(zhì)組合(干細(xì)胞生長(zhǎng)的基底層)和“傳代”方法,研究人員分開干細(xì)胞群,并將它們轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中。一些基板包括提供生長(zhǎng)因子的“飼養(yǎng)”細(xì)胞,而其他的則沒有。傳代是手動(dòng)或利用特殊的酶進(jìn)行。

 

該團(tuán)隊(duì)在近三年來,連續(xù)不斷地培養(yǎng)干細(xì)胞,并傳代100次以上。在實(shí)驗(yàn)過程中,研究人員利用一種識(shí)別基因組變化的方法,來分析細(xì)胞中的突變。

 

最后,研究人員利用人工傳代方法,在人工飼養(yǎng)層上生長(zhǎng)的干細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了最少的突變。

 

研究還指出了隨時(shí)間推移監(jiān)測(cè)細(xì)胞系的重要性。例如,研究中所出現(xiàn)的一個(gè)突變,似乎是TP53(腫瘤抑制基因,其缺失與癌癥相關(guān))缺失。

 

科學(xué)家說:“如果你想保持基因組的完整性,那么就在這些條件下,用飼養(yǎng)層細(xì)胞和人工傳代方法來培養(yǎng)細(xì)胞。同時(shí),分析你的細(xì)胞——這真的很容易。”

 


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