神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)單克隆抗體
日期:2017-06-26 14:53:14
一、GFAP結構特征
人類GFAP基因定位于17號染色體長臂2區1帶上,由9個外顯子和8個內含子組成;其蛋白質序列中有4個卷曲結構如下圖。GFAP主要分布于中樞神經系統的星形膠質細胞中,參與細胞骨架的構成并維持其張力強度。在中樞神經系統中,星形膠質細胞前體-即波形蛋白是中間絲蛋白的主要存在形式。星形膠質細胞的成熟伴隨著波狀蛋白向GFAP的轉化,GFAP被視為星形膠質細胞成熟化的標記物,GFAP的表達水平受發育過程和病理狀態的調節。其在軟骨細胞、成纖維細胞、肌上皮細胞、淋巴細胞、肝星形細胞也有表達。但外周系統所表達的GFAP不能被中樞神經系統的GFAP單克隆抗體檢測出,表明兩個來源的GFAP可能在結構上存在差異。
GFAP蛋白的線性結構,功能結構和關鍵的修飾位點
(圖片源自:Trends in Neurosciences)
二、GFAP的主要功能
目前認為GFAP的合成是星形膠質細胞分化過程的重要元素,并且與各種中樞神經系統的損傷存在關聯。通過測定GFAP基因的轉錄過程來研究發育中和疾病狀態下的中樞神經系統有著重要的意義。此外,GFAP的免疫組化染色有助于癌細胞與良性增生的鑒別,而且在小管癌中對于癌性小管和良性增生性小管的鑒別具有指導意義。
三、GFAP的應用
我們生產的GFAP單克隆抗體(CSB-MA009369A0m,100 µg/50 µg)可應用于ELISA、WB、IHC、IF、FC檢測。
WB:
GFAP
GFAP抗體與大鼠小鼠的腦組織均具有陽性反應,在WB檢測中出現單一目的條帶(50 Kd)。該抗體對于鼠腦組織具有較強的親和力,當抗體稀釋1000倍(2.7 ug/ml)使用的時候,仍然呈現單一的目的條帶。
IHC:
GFAP抗體在腦組織和神經膠質瘤組織里表達,定位在細胞質中,呈強陽性。
IF:
GFAP抗體在U251、SY5Y、U87神經類細胞的胞質中檢測到強發光信號。
FC:
GFAP
關于GFAP抗體的流式驗證,市場上只有少數幾家的公司做了該數據分析(其中較好的一家數據為:實驗組的發光強度是同型無關對照組發光強度的10倍)。在流式細胞檢測中,我們生產的抗體在SY5Y細胞中出現強陽性信號,且實驗組熒光強度是對照組的熒光強度的30倍,達到目前市場的領先水平。