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ELISA酶聯免疫試劑盒的主要組成成分有哪些?

日期:2025-04-02 09:57:00

    通常包括包被有抗原或抗體的微孔板、酶標記物(酶標抗體或酶標抗原)、底物溶液、緩沖液、標準品、陽性對照和陰性對照等。有些試劑盒還可能包含樣本稀釋液、終止液等。
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    ELISA 酶聯免疫試劑盒主要由以下幾類成分組成:
 
    固相載體:通常是聚苯乙烯微量反應板,具有良好的吸附性能,能使抗原或抗體牢固地結合在其表面,以便進行免疫反應。
 
    包被抗原或抗體:是試劑盒中的關鍵成分,用于固定在固相載體上,與樣品中的目標物質(抗體或抗原)發生特異性結合。
 
    酶標抗體或抗原:這是一種將酶與抗體或抗原通過化學方法偶聯而成的試劑。酶標抗體或抗原能與已結合在固相載體上的目標物質特異性結合,形成免疫復合物。常用的酶有辣根過氧化物酶(HRP)、堿性磷酸酶(AP)等。
 
    標準品:是已知濃度的目標物質,用于繪制標準曲線。通過檢測標準品的吸光度,建立吸光度與濃度之間的關系曲線,從而根據樣品的吸光度計算出其目標物質的含量。
    底物:是能被酶催化發生化學反應的物質,在酶的作用下會發生顏色變化或其他可檢測的信號變化。如 HRP 常用的底物是四甲基聯苯胺(TMB),在 HRP 的催化下,TMB 會從無色變為藍色,加入終止液后變為黃色,可通過酶標儀測定吸光度。
 
    緩沖液:包括包被緩沖液、洗滌緩沖液、稀釋緩沖液和終止液等。包被緩沖液用于將抗原或抗體包被到固相載體上;洗滌緩沖液用于在免疫反應過程中洗滌去除未結合的物質,減少非特異性吸附;稀釋緩沖液用于稀釋樣品、標準品和試劑等;終止液用于終止酶促反應,使反應停止在某一時刻,以便進行結果檢測。
 
    其他成分:可能還包括防腐劑,用于防止試劑在儲存過程中被微生物污染;封閉劑,如牛血清白蛋白(BSA)或明膠等,用于封閉固相載體上未被包被的位點,減少非特異性結合。

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