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人肝細胞生長因子HGF酶聯免疫試劑盒說明書?

日期:2025-03-11 13:47:32

cusabio詳細的說明書咨詢客服
以下是一份人肝細胞生長因子 HGF 酶聯免疫試劑盒說明書示例:

1、基本信息
    產品名稱:人肝細胞生長因子(HGF)ELISA 試劑盒
    英文名稱:Human Hepatocyte Growth Factor (HGF) ELISA Kit
    檢測方法:ELISA 酶聯免疫吸附法
    實驗類型:雙抗體夾心法
    應用:僅用于科研,不能用于臨床診斷
    適應物種:人
    保存條件:2-8℃
    有效期:6 個月


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2、試劑盒組成

試劑盒成份 96 孔配置 48 孔配置
酶標板 1 塊板(96T) 半塊板(48T)
塑料膜板蓋 1 塊 半塊
標準品 1 瓶(0.6ml) 1 瓶(0.3ml)
空白對照 1 瓶(1.0ml) 1 瓶(0.5ml)
標準品稀釋緩沖液 1 瓶(5ml) 1 瓶(2.5ml)
生物素標記的抗 HGF 抗體 1 瓶(6ml) 1 瓶(3.0ml)
親和鏈酶素 - HRP 1 瓶(10ml) 1 瓶(5.0ml)
洗滌緩沖液 1 瓶(20ml) 1 瓶(10ml)
底物 A 1 瓶(6.0ml) 1 瓶(3.0ml)
底物 B 1 瓶(6.0ml) 1 瓶(3.0ml)
終止液 1 瓶(6.0ml) 1 瓶(3.0ml)


3、樣本類型及處理

    血清:室溫血液自然凝固 10-20 分鐘,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉 / 分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
    血漿:應根據標本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉 / 分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
    尿液:用無菌管收集,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉 / 分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
    細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉 / 分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用 PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到 100 萬 /ml 左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉 / 分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
    組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的 PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉 / 分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

4、檢測范圍

    不同品牌檢測范圍有所不同,如華美生物在說明書中特別指出具體檢測范圍的常規值;cusabio為 15.6 pg/mL-1000 pg/mL。

5、操作步驟

    試劑準備:標準品系列稀釋在實驗時準備,不能儲存,稀釋前振蕩混勻;洗滌緩沖液用蒸餾水 50 倍稀釋。
    加樣:根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數,標準品和空白孔建議做復孔。加入稀釋好后的標準品 50μl 于反應孔、加入待測樣品 50μl 于反應孔內,立即加入 50μl 的生物素標記的抗體,蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育 1 小時。
    洗滌:甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩 30 秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,重復 3 次,若用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
    加酶:每孔加入 80μl 的親和鏈酶素 - HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育 30 分鐘。
    再次洗滌:操作同步驟 3。
    顯色:每孔加入底物 A、B 各 50μl,輕輕振蕩混勻,37℃溫育 10 分鐘,避免光照。
    終止:取出酶標板,迅速加入 50μl 終止液,加入終止液后應立即測定結果。
    測定:在 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。

6、注意事項

    試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
    濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
    各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5 分鐘內,如標本數量多,使用排槍加樣。
    請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高,需稀釋后再測定,計算時乘以總稀釋倍數。
    封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
    底物請避光保存。
    嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。
    所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
    本試劑不同批號組分不得混用。
    避免直接接觸終止液和底物 A、B,一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。


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