酶聯免疫試劑盒組成部分及作用
日期:2023-09-27 13:46:18
酶聯免疫試劑盒是常用于檢測和定量分析生物樣本中特定蛋白質、抗體等分子的方法。它通常由以下幾個組成部分構成,并且每個組成部分都有其特定的作用:
酶標記抗體/酶標記物:這是試劑盒中的關鍵成分,它是一種抗體,將與待檢測分子特異性結合的抗體與酶(如辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶等)進行化學結合。酶標記抗體的作用是在試劑盒運行過程中,與待檢測分子形成復合物,并提供酶活性用于信號放大。

待檢測樣本(Sample):這是被測試的生物樣本,可能是血清、血漿、尿液、細胞上清液等。待檢測樣本中含有我們感興趣的分子(如抗原、抗體),需要通過酶聯免疫試劑盒來定量檢測其濃度或存在與否。
捕獲抗體(Capture Antibody):這是特異性針對待檢測分子的抗體,其被固定在試劑盒的微孔板表面。捕獲抗體的作用是捕獲待檢測樣本中的目標分子,通過特異性結合來進行分離與富集。
標準品/質控樣本(Standard/Control Sample):這是一系列已知濃度的參考物質,用于建立標準曲線和質控樣本。標準品的濃度可以覆蓋待檢測樣本中可能存在的范圍,通過標準曲線擬合可以計算出待檢測樣本中目標分子的濃度。
顯色底物(Substrate):這是一種顯色或熒光底物,它能夠與酶反應產生可見或可測量的信號。常見的顯色底物有TMB(3,3',5,5'-四甲基聯苯胺)和ABTS(2,2'-氨基二乙基苯并硫酚),熒光底物如發光酶底物等。
停止液(Stop Solution):當底物反應完成后,停止液的加入可以終止酶反應,并防止進一步的信號放大。停止液的添加使讀數結果穩定。
通過以上組成部分的配合,酶聯免疫試劑盒可以通過酶標記抗體與待檢測分子的特異性結合、底物反應與信號生成,來實現對樣本中目標分子的定量檢測。這使得酶聯免疫試劑盒在生命科學研究、臨床診斷和藥物開發等領域得到廣泛應用。
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