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elisa試劑盒各試劑作用區別

日期:2023-09-25 15:35:47


    ELISA(酶聯免疫吸附試驗)是常用的生物學實驗技術,用于檢測和定量分析特定抗原或抗體的存在。ELISA試劑盒通常包含以下主要試劑:
 
1、涂布抗原
?    涂布抗原是一種包含目標抗原的溶液或片段。它負責在固相載體上固定目標抗原,使其與待測樣品中的特異性抗體發生結合反應。
 
2、樣品/標準
?    樣品是待測的生物樣本,可以是血清、血漿、組織提取物等。而標準則是已知濃度的目標抗原。
 
?    它們用于檢測和量化目標抗原的存在和水平,與涂布抗原進行結合反應。
 
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3、初級抗體
?    初級抗體是針對目標抗原的特異性抗體。它與樣品中的目標抗原結合形成免疫復合物。
 
?    初級抗體通常與輔助設備(如酶、熒光標記或生物素)結合,以便在后續步驟中檢測和定量。
 
4、洗滌緩沖液
?    洗滌緩沖液用于清洗試驗孔,去除未結合的物質(如非特異性結合物)。
 
?    它可以包含適當的鹽、洗滌劑和緩沖劑,以保持試驗環境的穩定。
 
5、二級抗體
?    二級抗體是與初級抗體結合并攜帶標記(如酶、熒光或生物素)的抗體。
 
?    它與初級抗體結合免疫復合物,進一步增強信號產生和檢測效果。
 
6、底物
?    底物是一種通過酶促反應觸發可見信號的化學物質。常見的底物包括酶標記的底物(如TMB、ABTS等)和熒光底物。
 
?    底物與酶結合時會發生顏色變化或熒光發射,用于定量或檢測信號。
 
7、停止液
?    停止液是一種改變反應pH值的溶液,用于停止底物反應,阻止進一步的信號產生。
它通常加入后會使顏色或熒光信號停止變化,并穩定所測得的信號。
 
?    ELISA試劑盒中的每個試劑在特定步驟中起到關鍵作用,用于實現抗原-抗體反應、清洗、信號生成和停止等過程,最終得到可靠的結果。具體的試劑和使用方法可能會因供應商和實驗目的而有所不同,因此在進行實驗時應仔細閱讀和遵循試劑盒說明書的操作指南。

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