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人免疫球蛋白G igg elisa試劑盒檢測步驟

日期:2023-08-10 10:48:05

    人免疫球蛋白G (IgG) ELISA試劑盒是用于檢測人體內(nèi)特定抗體IgG水平的一種實驗方法。以下是通常的步驟:
 
    樣本準(zhǔn)備:收集患者的血液樣本,并將其離心以分離血清。將血清樣本轉(zhuǎn)移到干凈的微量離心管中。
 
    樣本稀釋:按照試劑盒說明書中的建議,將稀釋緩沖液加入微量離心管中,以適當(dāng)稀釋樣本。確保按照比例準(zhǔn)確添加試劑和樣本。
 
    酶聯(lián)免疫吸附:將稀釋后的樣本加入預(yù)先包被了抗人IgG的酶標(biāo)板孔中。將酶標(biāo)板封閉并在適當(dāng)?shù)臏囟认路跤箻颖緝?nèi)的IgG與固定的抗體結(jié)合。
 
    洗滌:將酶標(biāo)板反復(fù)洗滌以去除未結(jié)合的物質(zhì),例如未結(jié)合的抗體和非特異性結(jié)合物。
 
    酶標(biāo)記:將酶標(biāo)記的二抗加入酶標(biāo)板孔中,使其與已結(jié)合的IgG結(jié)合。該二抗經(jīng)過特定處理使其能與IgG產(chǎn)生特異性結(jié)合。
 
    再次洗滌:將酶標(biāo)板再次洗滌以去除未結(jié)合的二抗。
 
    底物加入:加入底物溶液,使其與酶標(biāo)記的二抗反應(yīng)產(chǎn)生可測量的信號。底物的選擇取決于所使用的酶的性質(zhì)。
 
    停止反應(yīng):在一定時間后,加入反應(yīng)停止劑以終止酶反應(yīng)。停止劑的選擇取決于所使用的底物和酶的特性。
 
    讀取結(jié)果:使用ELISA閱讀器測量每個孔的吸光度,并記錄下來。
 
    數(shù)據(jù)分析:根據(jù)試劑盒說明書中提供的標(biāo)準(zhǔn)曲線和計算方法,計算出樣本中IgG的濃度或單位。
 
    這只是一個總體的步驟指南,具體的步驟可能會因不同的試劑盒和實驗室的要求而有所不同。因此,在使用ELISA試劑盒進行測試之前,請仔細(xì)閱讀試劑盒說明書,并按照其中的指導(dǎo)進行操作。

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