酶聯免疫吸附法試劑盒原理和作用
日期:2023-07-03 16:12:58
酶聯免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)是常用的免疫學檢測方法,用于檢測特定抗原或抗體的存在和濃度。ELISA試劑盒是用于執行ELISA實驗的一套化學試劑的組合。
ELISA試劑盒的原理是基于特異性抗原-抗體反應和酶的催化作用。一般來說,ELISA試劑盒包括以下幾個步驟:
固定:將待測樣品中的目標分子(抗原或抗體)固定在試驗板的表面上。通常使用多孔板(如96孔板)作為固相。
捕獲:將與目標分子特異性反應的捕獲抗體加入到孔中,與固定的目標分子形成抗原-抗體復合物。
檢測:加入與目標分子特異性結合的檢測抗體,形成二抗夾心復合物。檢測抗體上連接有特定的酶(如辣根過氧化物酶,HRP)。
反應:加入底物(如TMB),酶催化底物發生變色反應,產生可檢測的信號。酶的活性與目標分子的濃度成正比。
檢測:利用吸光度計或熒光計等儀器,測量反應產物的光吸收或熒光強度。根據標準曲線或參考樣品的信號值,可以確定待測樣品中目標分子的濃度。
ELISA試劑盒的作用是通過特異性的抗原-抗體反應,檢測和定量目標分子(抗原或抗體)的存在。ELISA廣泛應用于生物醫學研究和臨床診斷中,例如檢測感染性疾病、腫瘤標志物、激素水平等。
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