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重組蛋白的表達(dá)包含哪些技術(shù)?

日期:2024-01-25 14:30:50


    重組蛋白的表達(dá)是利用基因工程技術(shù)將目標(biāo)蛋白的編碼基因?qū)氲剿拗骷?xì)胞中,并使其表達(dá)出來。以下是一些常用的重組蛋白表達(dá)技術(shù):

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    原核表達(dá)系統(tǒng):包括大腸桿菌(E. coli)等原核細(xì)胞,通過將目標(biāo)基因插入到原核表達(dá)載體中,然后轉(zhuǎn)化至宿主細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)。
 
    酵母表達(dá)系統(tǒng):包括酵母菌(如釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae)和甲酵母(Pichia pastoris)等。酵母表達(dá)系統(tǒng)對于一些復(fù)雜的蛋白質(zhì)可以提供正確的折疊和修飾。
 
    昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng):常用的是昆蟲卵巢細(xì)胞線(Sf9)和昆蟲卵巢細(xì)胞線(Sf21),通過將目標(biāo)基因插入到昆蟲表達(dá)載體中,然后轉(zhuǎn)染至昆蟲細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)。
 
    哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng):包括CHO細(xì)胞(Chinese Hamster Ovary)、HEK293細(xì)胞(Human Embryonic Kidney 293)等。哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)能夠提供正確的蛋白質(zhì)折疊和修飾,適用于研究和生產(chǎn)中需要高度活性和復(fù)雜修飾的蛋白質(zhì)。
 
    細(xì)胞外表達(dá)系統(tǒng):通過將目標(biāo)基因?qū)氲秸婧思?xì)胞外表達(dá)載體中,然后轉(zhuǎn)染至宿主細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)。常見的細(xì)胞外表達(dá)系統(tǒng)包括大腸桿菌(E. coli)的外泌體表達(dá)、酵母表達(dá)系統(tǒng)的細(xì)胞外分泌表達(dá)等。
 
    病毒表達(dá)系統(tǒng):利用病毒載體將目標(biāo)基因?qū)氲剿拗骷?xì)胞中,并利用病毒的復(fù)制和表達(dá)機(jī)制來實(shí)現(xiàn)目標(biāo)蛋白的高效表達(dá)。
 
    以上是一些常見的重組蛋白表達(dá)技術(shù),具體選擇哪種技術(shù)取決于目標(biāo)蛋白的特性、表達(dá)需求以及宿主細(xì)胞的可行性和要求。
 

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