無細胞蛋白質合成系統原料有哪些?
日期:2023-07-19 15:57:51
無細胞蛋白質合成系統(Cell-Free Protein Synthesis,CFPS)是一種在離體體系中合成蛋白質的方法,不需要完整的細胞。以下是常見的無細胞蛋白質合成系統中使用的原料:
DNA模板:包含目標蛋白質編碼序列的DNA分子,作為合成蛋白質所需的指導信息。
原核細胞提取物:常用的是大腸桿菌(Escherichia coli)或其他細菌的細胞提取物。這些提取物包含了蛋白質合成所需的各種細胞機制,如核酸代謝、轉錄、翻譯、修飾等。
能量源:通常使用ATP、GTP、CTP、UTP和氨基酸等能量源來支持蛋白質合成過程。
氨基酸混合物:包含所有20種天然氨基酸,用于構建目標蛋白質的多肽鏈。
輔因子和酶:用于調節蛋白質的折疊、修飾和降解等過程的輔助因子和酶,如氧化還原系統、蛋白酶、酶抑制劑等。
緩沖液和鹽溶液:用于維持適宜的環境條件,調節pH值、離子濃度和滲透壓等參數。
能量再生系統:如磷酸化系統、核糖酮糖酸循環等能提供ATP的再生系統,用于支持合成過程中的能量需求。
此外,根據具體實驗要求,還可能添加其他輔助物質,如緩沖劑、蛋白質折疊輔助劑、表達調節因子等,以優化無細胞蛋白質合成系統的效率和產量。
不同的無細胞蛋白質合成系統可能使用略有不同的原料組分,具體的配方會根據實驗需求和研究目的進行調整。
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