elisa競爭法測抗原的步驟
日期:2023-09-28 15:11:25
以下是一般情況下使用競爭ELISA法測定抗原的基本步驟:
準備試劑:根據試劑盒的說明書,準備所需的試劑,包括抗原標準溶液、抗原檢測樣品、酶標記的抗體溶液、底物溶液和洗滌緩沖液等。
處理酶標板:將微孔板的孔位填充抗原標準溶液,以建立抗原濃度的標準曲線。同時,在其他孔位中加入抗原檢測樣品,用于與標準曲線進行比較。

添加酶標記抗體:將酶標記的抗體溶液加入所有孔位,包括標準曲線孔位和待測樣品孔位。酶標記的抗體與抗原競爭結合。
孵育和洗滌:將孔板覆蓋,進行適當的孵育時間,以便抗原和酶標記抗體相互競爭。之后,使用洗滌緩沖液多次洗滌孔位,以去除未結合的物質。
加入底物:將底物溶液加入所有孔位,并在一定的反應時間后停止反應。底物與酶標記結合的抗體產生顏色反應。
閱讀結果:使用酶標儀或其他適當設備,測量各孔位的光密度。光密度的值與抗原的濃度成反比。
數據分析:通過標準曲線和待測樣品的光密度值,計算出待測樣品中抗原的濃度。
這些步驟是一般競爭ELISA法的基本流程,但具體步驟可能因不同試劑盒的使用說明而有所調整。因此,建議根據您所使用的試劑盒的說明書來進行操作,并遵循廠家提供的實驗方案和說明書。
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