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免疫金標記技術原理

日期:2023-07-13 16:05:17


    免疫金標記技術是一種常用的免疫組化技術,用于檢測細胞或組織中特定抗原的存在和定位。其原理基于抗原與特異性抗體的結合,并利用金顆粒作為標記物進行可視化。
 
以下是免疫金標記技術的基本原理:
 
    抗原取樣:首先需要制備樣品,可以是細胞、組織切片或涂片等。樣品需要固定和處理,以保持其形態和抗原的完整性。
 
    抗原解剖:樣品中的目標抗原需要暴露出來,通常通過脫脂、切片、抗原修復等步驟進行。
 
    特異性抗體結合:將具有對目標抗原特異性的一抗(一級抗體)加入樣品中,使其與目標抗原結合。一抗通常是由動物(如小鼠、兔子)免疫制備得到,能夠特異性地識別并結合目標抗原。
 
    二抗的結合:將與一抗來源動物不同的物種制備的二抗(二級抗體)添加到樣品中,二抗通常是與金顆粒結合的抗體。二抗能夠與一抗結合,形成一抗-二抗復合物。
 
    金標記物的可視化:由于二抗與金顆粒結合,因此可以通過金顆粒的特殊光學性質進行可視化。金顆粒呈現出明亮的電子顯微鏡信號,也可以在熒光顯微鏡下觀察到。
 
    分析和結果解讀:通過光學顯微鏡或電子顯微鏡觀察樣品,并根據金顆粒的位置和數量判斷目標抗原的存在和定位。金顆粒的位置和密度通常與目標抗原的表達水平相關。
 
    免疫金標記技術利用特異性抗體結合目標抗原,并通過金顆粒作為標記物進行可視化。它可以用于檢測和定位細胞或組織中特定抗原,是一種常見且有效的免疫組化技術。

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