怎么提高重組抗體的表達(dá)量？
日期：2025-05-15 13:39:00
優(yōu)化表達(dá)載體：合理設(shè)計(jì)載體元件，如選擇強(qiáng)啟動(dòng)子（如 CMV、EF1α ）增強(qiáng)基因轉(zhuǎn)錄，添加有效的終止子保證轉(zhuǎn)錄終止；優(yōu)化 5’和 3’非翻譯區(qū)（UTR），提高 mRNA 的穩(wěn)定性和翻譯效率；引入增強(qiáng)子元件，提升基因表達(dá)水平。
選擇合適的宿主細(xì)胞：根據(jù)抗體特性和生產(chǎn)需求，篩選高表達(dá)、遺傳穩(wěn)定的宿主細(xì)胞株。例如，經(jīng)過馴化的 CHO 細(xì)胞系更適應(yīng)無血清培養(yǎng)，能提高表達(dá)量和生產(chǎn)效率。
優(yōu)化培養(yǎng)條件：調(diào)整培養(yǎng)基成分，補(bǔ)充合適的氨基酸、維生素和微量元素；控制培養(yǎng)溫度、pH 值、溶氧量等參數(shù)，例如降低培養(yǎng)溫度可減緩細(xì)胞代謝速度，延長(zhǎng)細(xì)胞存活時(shí)間，促進(jìn)蛋白質(zhì)正確折疊和表達(dá)；采用分批補(bǔ)料或連續(xù)灌流培養(yǎng)模式，及時(shí)補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，去除代謝廢物，維持細(xì)胞活性和高表達(dá)狀態(tài)。
蛋白質(zhì)折疊與分泌輔助：共表達(dá)分子伴侶和折疊酶，幫助抗體正確折疊，減少錯(cuò)誤折疊和聚集；對(duì)信號(hào)肽進(jìn)行優(yōu)化，增強(qiáng)抗體的分泌效率，使其更順利地從細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞外。
