構建嵌合抗體的基本原理
日期：2023-10-25 15:27:30
構建嵌合抗體的基本原理涉及將兩個不同物種的抗體結構元素進行組合，通常是將人源化的抗體的恒定區與動物源的抗體的可變區進行組合。
? 下面是構建嵌合抗體的基本步驟：
? 確定目標抗體：首先需要確定目標抗體，即要構建嵌合抗體的動物源抗體和人源化抗體。動物源抗體通常具有較高的親和力和特異性，但可能會引起免疫反應；人源化抗體則具有較低的免疫原性。根據需要選擇適當的抗體作為目標。
? 克隆可變區基因：通過克隆和擴增動物源抗體的可變區基因，可以使用PCR或其他適當的方法從抗體產生的B細胞中提取DNA，并擴增出可變區基因。
? 構建嵌合基因：將人源化的抗體的恒定區基因與克隆得到的動物源抗體的可變區基因進行連接。這可以通過重組DNA技術來實現，其中可以使用限制性內切酶切割兩個基因并連接它們，或者使用PCR擴增方法在兩個基因之間添加適當的連接序列。
? 轉染表達系統：將構建好的嵌合基因導入到適當的表達系統中，如細胞系或真核生物表達系統。這樣可以使嵌合基因在細胞中得到表達，并產生嵌合抗體。
? 抗體篩選和鑒定：從轉染的細胞中篩選和鑒定表達的嵌合抗體。這可以通過ELISA、免疫組化、流式細胞術等技術來檢測和鑒定嵌合抗體的特異性和親和力。
? 生產和純化：對于具備理想特性的嵌合抗體，可以進行大規模的生產和純化，以獲得足夠的量用于進一步的實驗研究或臨床應用。
? 構建嵌合抗體的基本原理是將人源化抗體的恒定區與動物源抗體的可變區進行組合，以兼顧動物源抗體的特異性和親和力，同時減少人源抗體的免疫原性。這種技術在抗體工程和藥物研發領域具有廣泛的應用。
上一篇： 嵌合抗體和改型抗體的區別
下一篇： 抗體輕鏈與重鏈的重排與表達調控
