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雜交瘤技術制備單克隆抗體的主要過程

日期:2023-09-21 13:14:07


制備單克隆抗體的主要過程是通過雜交瘤技術實現的。以下是其主要步驟:
 
    免疫原注射:將目標抗原注射到小鼠等動物的體內,激活其免疫系統產生特異性抗體。
 
    細胞融合:提取免疫動物的B細胞(產生抗體的細胞)和骨髓瘤細胞(不斷分裂的癌細胞),進行細胞融合。
 
    雜交瘤篩選:將融合細胞培養在含有選擇性培養基的培養皿中,使只有雜交瘤能夠存活,而其他細胞死亡。
 
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    篩選單克隆細胞:通過稀釋法將雜交瘤細胞進行分離培養,使每個細胞單獨分裂形成單個細胞克隆,最終獲得單克隆細胞。
 
    驗證單克隆性:對每個單克隆細胞進行酶聯免疫吸附試驗(ELISA)等方法驗證其產生的抗體特異性和單一性。
 
    擴大培養:將驗證為單克隆的細胞進行擴大培養,以大量產生抗體。
 
    純化抗體:通過柱層析等方法對培養上清液進行純化,獲得單克隆抗體。
 
    制備單克隆抗體的過程中,雜交瘤技術的關鍵在于融合免疫動物的B細胞和骨髓瘤細胞,從而實現長期穩定地大量產生特異性抗體的單克隆細胞。這種技術的應用廣泛,可以用于生物醫學研究、藥物研發、疾病診斷等領域。