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大鼠單克隆抗體的制備原理

日期:2023-09-13 13:36:00


大鼠單克隆抗體的制備主要包括以下步驟:
 
    免疫:將特定抗原注射到小鼠體內(nèi),激發(fā)其免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗原特異性抗體。
 
    融合:從免疫小鼠體內(nèi)提取脾細(xì)胞和骨髓細(xì)胞,與鼠髓瘤細(xì)胞(如SP2/0或NS0細(xì)胞)進(jìn)行細(xì)胞融合,形成雜交瘤細(xì)胞(hybridoma)。
 
    篩選:通過(guò)培養(yǎng)基中的選擇性物質(zhì),篩選出雜交瘤細(xì)胞并進(jìn)行克隆化,得到單克隆細(xì)胞株。
 
    培養(yǎng)和收獲:將單克隆細(xì)胞株培養(yǎng)在培養(yǎng)基中,使其不斷增殖。當(dāng)培養(yǎng)基內(nèi)的抗體達(dá)到一定濃度時(shí),收獲培養(yǎng)上清液。
 
    純化和鑒定:使用親和層析、離心、超濾等方法對(duì)培養(yǎng)上清液進(jìn)行純化,獲取純化的單克隆抗體。同時(shí),可以通過(guò)免疫電泳、Western blot等技術(shù)進(jìn)行鑒定,確保所得抗體具有特定的抗原結(jié)合活性。
 
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    整個(gè)過(guò)程中,關(guān)鍵的一步是雜交瘤細(xì)胞的融合,它使得不穩(wěn)定的抗體產(chǎn)生細(xì)胞克隆,保證了后續(xù)大量高效的抗體產(chǎn)生。這種制備方法可用于制備高度特異性和高親和力的單克隆抗體,以滿足科學(xué)研究、生物藥物開(kāi)發(fā)等領(lǐng)域的需求。

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