鼠抗雞IgY單克隆抗體制備技術(shù)
日期：2023-07-25 16:37:18
鼠抗雞IgY單克隆抗體制備技術(shù)是一種通過鼠源性B細(xì)胞與雞IgY抗原進(jìn)行免疫和融合的技術(shù)流程，用于獲得針對雞IgY的高特異性和高親和力的單克隆抗體。以下是一般的鼠抗雞IgY單克隆抗體制備技術(shù)步驟：
抗原制備：從雞的血清或蛋黃中提取IgY抗原，可以通過凝集素沉淀、離心等方法純化IgY。
免疫原選擇：選擇適當(dāng)?shù)拿庖咦魟┖兔庖哂?jì)劃，將雞IgY抗原注射到小鼠體內(nèi)，激發(fā)小鼠產(chǎn)生免疫應(yīng)答。
融合細(xì)胞制備：在免疫結(jié)束后，收集小鼠脾臟等淋巴組織，制備單細(xì)胞懸浮液。
隨機(jī)雜交：將小鼠B細(xì)胞與鼠髓瘤細(xì)胞（如SP2/0或NS-1）進(jìn)行融合，形成雜交瘤細(xì)胞。
雜交瘤篩選：在培養(yǎng)基中篩選出產(chǎn)生針對雞IgY的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞。
單克隆抗體擴(kuò)增：將成功篩選出的單克隆細(xì)胞株進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)。
單克隆抗體純化：通過離心、過濾和親和層析等技術(shù)，從培養(yǎng)上清中純化出單克隆抗體。
驗(yàn)證和鑒定：對純化得到的單克隆抗體進(jìn)行特異性和親和力的驗(yàn)證和鑒定。
每個(gè)實(shí)驗(yàn)室可能有不同的優(yōu)化步驟和具體操作細(xì)節(jié)，請?jiān)趯?shí)施前參考相關(guān)文獻(xiàn)或咨詢專業(yè)人士。
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