抗體純化的步驟
日期:2023-07-12 14:48:17
抗體純化是分離和純化特定抗體(免疫球蛋白)的過程。以下是常見的抗體純化步驟:
樣品準備:收集包含抗體的生物樣品,如血漿、血清或細胞培養上清液。
預處理:將樣品進行預處理,去除大顆粒物質和雜質。可以通過離心、過濾或稀釋等方法來完成。
親和層析:利用親和柱或親和樹脂選擇性地捕獲目標抗體。這些親和柱或樹脂通常與特定的抗體結合蛋白質或配體相互作用,從而實現抗體的富集。
洗脫:使用合適的洗脫緩沖液,洗脫非特異性吸附的蛋白質和雜質。同時保留目標抗體在柱上。
濃縮和純化:將洗脫得到的抗體溶液進行濃縮,可以使用濃縮裝置或濃縮柱。接著,可以通過透析或其他方法進一步純化抗體,去除剩余的溶質和雜質。
確認純度:使用蛋白質分析技術(如SDS-PAGE、Western blot)驗證抗體純度和目標抗原的特異性。
抗體純化的具體步驟會因應用和實驗需求的不同而有所差異。在進行抗體純化時,還需要遵守相關的實驗室操作規范,并采取適當的質量控制措施來確保抗體的質量和純度。
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