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雙特異性抗體的制備方法

日期:2023-05-31 13:28:35


    雙特異性抗體(bispecific antibodies, BsAbs)是近年來快速發展的一種新型生物藥物,具有兩個不同的抗原結合位點,能夠同時與兩種特異性抗原結合,從而實現多種治療方式的應用。該類抗體的制備方法多種多樣,常見的制備方法包括雜交免疫球蛋白(heterodimeric Fabs)、雙鏈變量區抗體(variable domains of heavy and light chains,VHH-VL)和微型抗體(diabodies)等。
 
一、雜交免疫球蛋白制備方法
 
    雜交免疫球蛋白(heterodimeric Fabs)可由兩個單一特異性抗體的 Fab 片段組成。該方法的制備流程如下:

    1、
分別構建兩個不同的單一特異性抗體。
    2、將兩個抗體的 Fab 片段分別剪切下來。
    3、通過交聯反應,將兩個 Fab 片段結合起來形成雜交免疫球蛋白。


抗體


 
二、雙鏈變量區抗體制備方法
 
    雙鏈變量區抗體(VHH-VL)是基于自然的駱駝、鯨魚等動物體內生成的單域抗體進行改造得到的,其特點是只包含一個完整的抗原結合位點,但具有高度的親和力和穩定性。該方法的制備流程如下:
 
    1、通過免疫技術或基因工程技術制備單域抗體(VHH)。
    2、使用鏈重組技術,將兩個 VHH 片段結合起來,形成雙鏈變量區抗體。


特異性抗體


 
三、微型抗體制備方法
 
    微型抗體(diabodies)是由兩個不同特異性抗體的重鏈變量區和輕鏈變量區相互連接而成的分子,它可以以二聚體的形式,同時與兩種抗原結合。該方法的制備流程如下:
 
    1、利用基因工程技術從兩個單一特異性抗體中分離出重鏈和輕鏈變量區。
    2、將兩個變量區連接起來,形成蛋白質分子。
    3、通過經驗確定合適的二聚體構型,并進行優化。
 
    以上是雙特異性抗體的主要制備方法,各種制備方法都有其優缺點,選擇恰當的制備方法需要根據具體應用情況和目標去選擇。


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