新的非病毒基因載體提高5倍轉染率
日期:2014-01-02 09:37:02
聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,PEI)是一種陽離子聚合物,已經被廣泛地進行研究,顯示出作為一種有效的基因傳遞工具的前景。同樣地,HIV-1 Tat肽,是一種可透過細胞膜的肽,已經被成功應用于細胞內的基因傳遞。為了提高這兩種載體的良好性能,紐約大學理工學院(NYU-Ploly)和紐約大學牙醫學院(NYUCD)的研究人員,在其實驗室中,將這兩種載體進行組裝,開發出一種載體——新的復合物是一種肽聚合物混合物。與今天的商業傳遞方法——試劑載體相比,這種新載體,能夠將DNA導入細胞的效率提高5倍。
這項研究成果,以“Long Term Efficient Gene Delivery Using Polyethylenimine with Modified Tat Peptide”為題,將在2014年2月份的Biomaterials雜志上刊出。這個發現,是由NYUCD的Seiichi Yamano博士和NYU-Poly的Jin Montclare博士進行的一項合作研究項目的結果。本研究結果,可幫助研究人員更好地了解基因的功能,最終改進基因療法。
非病毒載體,例如本研究設計的這些載體,被用于轉染——將外源遺傳物質(在本研究中,DNA稱為質粒)導入細胞的過程。載體,本質上是將遺傳物質導入細胞的工具。但是轉染并不是那么容易。細胞被建立以使其它物質不能進入細胞核。即使運輸的質粒設法透過細胞膜,細胞內的細胞質,也為阻止其它物質進入細胞核提供了保護。
傳統上,科學家們已經設計了進行轉染的病毒,但是病毒是不確定的,因為細胞會將它們識別為外源和觸發的免疫反應。病毒轉染是極其昂貴的,為批量加工造成了眾多困難。另一方面,非病毒載體不會觸發免疫系統,很容易加工和修改成安全而更有效的傳遞方式。其缺點是,它們通常只在轉染以及其它形式的基因表達中的短期內有效。
在這個項目中,Yamano和Montclare將一個修改版本的CPP HIV-1(mTat),與PEI——對傳遞寡核苷酸尤其有效的非病毒載體——進行配對。他們將mTat和PEI進行組合,構建了一個非病毒載體,比單獨的mTat或PEI更加有效。研究人員不僅在體外——生長在一個有蓋培養皿中,也在體內——在一個活體生物體中大約7個月,檢測了這個試劑載體。這個載體可以用于未來的靶向性基因治療。
除了Montclare和Yamano之外,NYUCD假牙修復學系的Jisen Dai、Shigeru Hanatani、Ken Haku、Takuto Yamanaka、Mika Ishioka和Tadahiro Takayama博士,NYU-Poly化學和生物分子工程系的Carlo Yuvienco,NYU阿布扎比工程分部的Sachin Khapli,和NYUCD兒童口腔醫學系的Amr Moursi,都參與了這個項目。
這項研究,由美國國家科學基金會(NSF)、NSF材料科學與工程研究中心(MRSEC)和美國陸軍研究辦公室資助支持。
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