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光可以控制基因開關(guān)

日期:2013-07-26 11:44:12

雖然人類基因組大約有兩萬多個(gè)基因,但是只有一小部分基因是持續(xù)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄和翻譯的。這是根據(jù)細(xì)胞的狀態(tài)決定的,而細(xì)胞的狀態(tài)是隨時(shí)變化的。研究人員希望尋找快速控制基因的開關(guān),以探究基因的表達(dá)情況。

 

哈佛-麻省理工博德研究所(Broad Institute of MIT and Harvard)的研究人員,借助一項(xiàng)新技術(shù)找到了一個(gè)可以快速啟動(dòng)或者終止基因的表達(dá)的途徑,那就是照射細(xì)胞的

 

這項(xiàng)工作是基于一項(xiàng)被稱為光遺傳學(xué)的技術(shù)進(jìn)行的研究。光遺傳學(xué)技術(shù)的原理是光可以改變光敏感蛋白質(zhì)的功能。幾乎就在光出現(xiàn)的同時(shí),光敏感蛋白接收光信號(hào),快速促進(jìn)或者抑制基因的表達(dá)。

 

麻省理工學(xué)院腦認(rèn)知方向的研究生 Silvana Konermann 表示:“基因表達(dá)是一個(gè)快速的動(dòng)態(tài)過程,迄今為止, 用來干預(yù)基因表達(dá)的方法都是非動(dòng)態(tài)的。如果要想更深入地了解基因表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化情況,就必須用一些與這個(gè)過程相符的動(dòng)態(tài)的自然發(fā)生的手段干預(yù)基因的表達(dá)。”

 

如果能夠精確地控制基因表達(dá)和持續(xù)的時(shí)間,就能了解某些特定基因的功能,尤其是那些參與學(xué)習(xí)和記憶的基因。其還能應(yīng)用于表觀遺傳學(xué)修飾的研究。

 

目前這一研究在線刊登在了近期出版的《Nature》雜志上。該論文的資深作者是麻省理工學(xué)院麥戈文腦研究所的助理教授張鋒,他同時(shí)也是布羅德研究所(Broad Institute)的核心成員。

 

光控開關(guān)

 

光控開關(guān)系統(tǒng)由幾個(gè)相關(guān)聯(lián)的部分構(gòu)成,轉(zhuǎn)錄激活因子(TALE), CRY2(一種光敏感蛋白)和 CIB1 CRY2 的天然結(jié)合蛋白)。 DNA 結(jié)合蛋白 TALE 組合成特定的形式與 DNA 結(jié)合。 TALE CRY2 融合在一起。當(dāng) CRY2 遇到光線,它就會(huì)改變結(jié)構(gòu)與 CIB1 結(jié)合。這幾部分協(xié)同作用,行使細(xì)胞的遺傳指令——調(diào)控 DNA 轉(zhuǎn)錄成 mRNA

 

利用這一原理,研究人員將 CIB1 改造成可以與另外一個(gè)蛋白相結(jié)合的形式參與基因表達(dá)的調(diào)控。光開關(guān)系統(tǒng)進(jìn)入細(xì)胞后, TALE 與目的 DNA 結(jié)合。當(dāng)有光線照射到細(xì)胞時(shí), CRY2 蛋白與原本游離在細(xì)胞中的 CIB1 相結(jié)合。 CIB1 攜帶的基因活化蛋白啟動(dòng) DNA 的復(fù)制或者轉(zhuǎn)錄。或者, CIB1 攜帶的基因抑制蛋白抑制 DNA 的復(fù)制或者轉(zhuǎn)錄。

 

一個(gè)單一的光脈沖足以誘導(dǎo)蛋白結(jié)合,啟動(dòng) DNA 復(fù)制和轉(zhuǎn)錄。研究人員發(fā)現(xiàn),每分鐘一次左右的光脈沖是實(shí)現(xiàn)連續(xù)轉(zhuǎn)錄最有效的頻率。另外,連續(xù)給予30分鐘的光脈沖,目的基因轉(zhuǎn)錄 mRNA 的水平顯著增加,而光脈沖一旦停止, mRNA 的水平約在30分鐘內(nèi)開始下降。

 

研究人員通過對(duì)來自實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的神經(jīng)元和取自動(dòng)物的細(xì)胞中的 30 個(gè)不同的基因進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn),基因開關(guān)系統(tǒng)均可以使其轉(zhuǎn)錄水平增加。

 

斯坦福大學(xué)生物工程和光遺傳學(xué)教授 Karl Deisseroth 說,該研究的創(chuàng)新點(diǎn)在于其光控開關(guān)系統(tǒng)控制的不是人工合成的基因,而是取自細(xì)胞的基因。基于這一技術(shù),可以觀測特定的基因在特定時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)情況。

 

表觀遺傳學(xué)修飾

 

基因表達(dá)調(diào)控開關(guān)的另外一個(gè)作用就是研究表觀遺傳學(xué)修飾。表觀遺傳學(xué)一個(gè)重要的領(lǐng)域就是組蛋白的化學(xué)修飾。組蛋白可以與 DNA 結(jié)合在一起,控制相關(guān)基因的表達(dá)。研究人員發(fā)現(xiàn)可以通過 TALE 與組蛋白融合改變表觀遺傳學(xué)修飾。

 

表觀遺傳學(xué)修飾在學(xué)習(xí)和記憶形成過程中發(fā)揮了重要的作用,但是由于缺少有效的途徑干預(yù)組蛋白的修飾,導(dǎo)致這一課題沒有進(jìn)一步深入研究。新技術(shù)的應(yīng)用可以精確地干預(yù)單一基因的表達(dá),從而給該課題的研究提供了可能性。

 

目前,研究人員已經(jīng)證實(shí),一些組蛋白的結(jié)構(gòu)域可以與光敏感蛋白結(jié)合,他們正在擴(kuò)充可以被應(yīng)用到基因調(diào)控系統(tǒng)中的組蛋白修飾的類型。

 

該研究小組的成員 Mark Brigham 表示:“擴(kuò)充可控的表觀遺傳學(xué)標(biāo)記的數(shù)量是非常有用的,希望大家能將這一技術(shù)利用起來。”

 


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