倫敦奧運會話題:反興奮劑研究
日期:2012-07-30 08:26:48
今年的夏季奧運會對于那些濫用藥物的運動員而言將會是最為艱難的一屆比賽。以傳統(tǒng)測試為例,來自摩洛哥的長跑運動員Mariem Alaoui Selsouli,1500米跑金牌有力的沖擊者,因檢測發(fā)現(xiàn)樣本中有禁用的利尿劑呋塞米(furosemide)而被禁止參與倫敦奧運會。今年,科學家們還納入了更多強有力的技術以逮住那些開始調整策略避免興奮劑檢測檢出的運動員。
英國HFL Sport Science藥物檢測實驗室藥物與興奮劑檢測首席科學家Phil Teale解釋說:“新的測試采用大量不同的策略將網撒的更寬。而不再是采用那些只能檢測一種預定義藥物組的集中性的方法。”
Teale指出歷史上研究人員是采用質譜法來鑒定合成代謝類固醇和其他違禁化合物,但這種技術要求預先知道藥物的結構。這使得“專門設計的”的類固醇能夠逃避檢測,例如四氫孕三烯酮(THG)具有與其他類固醇相同的效應,可提高速度或增加肌肉質量,但結構卻略有不同。然而此次倫敦奧運會實驗室與葛蘭素史克(GlaxoSmithKline)制藥公司以及倫敦大學國王學院藥物控制中心共同努力,獲得了幾臺能夠記錄所有樣本數(shù)據(jù)的質譜儀,這將使得官員們能夠逆向篩查樣本尋找新發(fā)現(xiàn)的性能增強的物質。
研究人員也在展開以細胞為基礎的檢測研究,這可以讓科學家們在即便不知道檢測的是何種類固醇的情況下也能夠給出關于類固醇濫用的信息。一種方法是利用酵母報告系統(tǒng),當有合成代謝類固醇激活雄激素受體時,β-半乳糖苷酶會被開啟。在近期的一項研究中,研究人員證明包含THG等多種合成代謝類固醇的尿液樣本可以促使β-半乳糖苷酶表達,而非合成代謝類固醇如雌激素則不會。另一項研究證明酵母報告系統(tǒng)能夠在攝入2周后檢測到單個類固醇的劑量,而標準質譜檢測只能在藥物攝入的頭6天檢測到。
對于其他的一些興奮劑,例如某些運動員相信注射人生長激素(hGH)可以提高肌肉性能,還難以直接進行檢測。在2008年的北京奧運會對于hGH的檢測主要是測量生長激素亞型的變化比值來確定是否注射了重組hGH(模擬了一種特殊的天然亞型)。倫敦大學國王學院的名譽教授Peter Sönksen說現(xiàn)在還只能在24小時內檢測重組hGH,這樣的檢測因此對于檢測長期hGH濫用是無效的,而hGH必須是用藥數(shù)月才能顯現(xiàn)效應。不過數(shù)周前世界反違禁藥物組織(World Anti-Doping Agency,WADA)批準了一種新生物標記物檢測,在倫敦奧運會將初次登場。它可以檢測胰島素樣生長因子-1(IGF-1)和膠原蛋白的突然增高。機體對hGH做出反應會生成膠原蛋白,利用它可以揭示hGH濫用,并可以在注射2周后檢測到人工hGH。
另一種常見性能增強藥物是紅細胞生成素(EPO),能夠促進紅細胞生成,使運動員提高血液攜氧能力?!叭绻闳サ礁吆0蔚貐^(qū),EPO增高,就可以調高其他基因,”James Rupert說。James Rupert在英屬哥倫比亞大學從事EPO研究。但如果只有EPO水平增高,而沒有伴隨一組高地誘導基因,則表明有可能是通過注射重組蛋白,人為給予的EPO。雖然這一研究還未產生一種反興奮劑測試,“原理上是可靠的,”Rupert說。Rupert希望能看到未來EPO檢測被納入到奧運會反興奮劑檢測中。由瑞典科學家研究的另一種新的EPO檢測策略是依賴重組EPO與內源性EPO的碳水化合物修飾的差異圖譜。如果取得成功,這種檢測相比當前的方法將能檢測更少量的重組EPO。
科學家們也在尋找興奮劑的間接證據(jù)。一種流行的提高紅細胞的方法就是用運動員獎過去移除并保存的血液拿來進行自體輸血。自體血液興奮劑具有與EPO一樣的益處,“并且檢測不到,”蘇黎世大學心臟生理學家Carsten Lundby解釋說。它不會改變運動員的激素圖譜或DNA序列(像來自供體的血液就有可能)——這些改變可通過傳統(tǒng)測試進行測定。但是,科學家們正在努力。例如一種新技術甚至并非檢測血液,而是檢測尿液。在儲存血液的塑料袋中有一種稱為鄰苯二甲酸鹽(phthalates)的化合物,可以滲入到樣本中,將血液輸回到運動員體內將把這種不尋常的化合物也引入到體內。西班牙和匈牙利的研究人員正在設計一種技術檢測尿液中鄰苯二甲酸鹽的代謝產物,作為輸血的證據(jù)。
Rupert說另一個困難是確定是否測量如激素等潛在興奮劑,因為其在運動員血液中真正增高水平在個體間差異很大,且精英運動員可能開始就不會有這樣的“正常”水平。相反,隨時間采集運動員的多個血液和尿液樣本變得越來越普遍,構建出一個“生物學護照”使興奮劑官員獲得每個人的標準正常范圍。只有超出個體運動員的正常范圍的變化才會引起懷疑。
Teale 說:“研究人員正在研究各種方法學。有了當前的測試和開發(fā)中的新策略,我們真的有機會審查并深度挖掘運動員的樣本?!?/SPAN>
除了設計更好地針對已知興奮劑策略的測試,科學家們也希望能夠預測肆無忌憚的教練和運動員有可能接下來嘗試的策略。未來可能的一種興奮劑方法是基因治療,將增強性能的基因通過病毒載體導入到運動員的基因組中。盡管這樣的遺傳興奮劑例子還沒有得到證實,一些研究人員相信這只是時間的問題。Sönksen指出1988年漢城奧運會早期采用hGH作為興奮劑(遠早于科學家們真正了解它)就是一個警示故事。
基因治療或許不會太遙遠。例如Repoxygen是一種傳遞EPO基因的病毒載體,已經對貧血患者開展了有限次的測試。這對想要提高自身EPO水平增強性能的運動員是一個明顯的興趣。研究人員擔心一旦基因整合到基因組中,將生成無法與正常形式相區(qū)別的EPO。但科學家們也提出一些可能性,整合EPO基因可能會包含病毒載體基因組的殘余物,表明這樣的外源DNA可用作EPO基因治療的標記物。此外,人為引入基因通常會被除去內含子,留下一個可檢測的DNA標記,Rupert說。