在线日韩日本国产亚洲丨少妇伦子伦情品无吗丨欧美性猛交xxxx免费看蜜桃丨精品人妻系列无码一区二区三区丨亚洲精品无码不卡在线播放

Your Good Partner in Biology Research

PLoS:構建植物ihpRNA新方法

日期:2012-06-12 10:45:56

來自中科院華南植物園,中國熱帶農業科學院等處的研究人員發表了題為“High-Throughput Construction of Intron-Containing Hairpin RNA Vectors for RNAi in Plants”的文章,設計出了一種基于Golden Gate克隆技術構建含內含子發夾結構RNAihpRNA)表達載體的新方法。相關成果公布在國際學術期刊PLoS ONE上。

 

文章的通訊作者是華南植物園華南農業植物遺傳育種重點實驗室段俊研究員,以及中國熱帶農業科學院趙鵬(Peng Zhao,音譯),第一作者是博士生言普。

 

RNA干擾(RNA interferenceRNAi)是通過雙鏈RNA(double-stranded RNAdsRNA)介導,特異性地降解靶mRNA,使同源的靶基因發生沉默,即序列特異性轉錄后基因沉默(Post-Transcriptional Gene SilencingPTGS),從而誘使細胞表現出特定基因缺失的表型。RNAi現象普遍存在于從真菌到植物、從無脊椎動物到哺乳動物的各種生物中。如真菌的靜息作用、植物的轉錄后基因沉默、動物的RNAi,雖然在不同物種中的名稱不同,但其分子機制極其相似。

 

自從發現雙鏈RNA能引發RNA干擾現象后,RNAi已經成為分析基因功能的重要工具之一。隨著RNAi技術在植物基因功能分析上的廣泛應用,迫切需要一種高通量構建發夾RNAhpRNA)表達載體的方法。

 

在這篇文章中,研究人員設計出了一種基于Golden Gate克隆技術構建含內含子發夾結構RNAihpRNA)表達載體的新方法。利用該方法,只需在擴增靶基因序列的同時,由引物在序列兩端加上相應的BsaI識別和切割位點,經一步酶切/連接反應后,此靶基因片段能同時以正向和反向的位置克隆到pRNAi-GG,形成ihpRNA表達載體結構。

 

而且整個構建過程只需在一管中通過一個反應完成,構建效率高,且無背景干擾,同時由于pRNAi-GG為植物雙元表達載體,構建好的ihpRNA表達載體可直接用于農桿菌轉化研究。這一載體構建方法具有簡單、快速、高效和成本低等優點,為大規模的植物功能基因研究提供了一個高通量的平臺。

 

之前的研究曾表明,用含有內含子的發夾RNAi結構表達dsRNA的植物中,90%表現出沉默效應,而用發夾RNA(Hairpin RNAhpRNA)、正義和反義結構分別僅有58%13%12%的沉默效應。因此針對ihpRNA的研究,逐漸受到了科學家們的關注。

 

曾有研究人員利用Gateway重組克隆技術,構建高通量基因沉默的載體系列pHELLSGATE,包括全部擬南芥基因組的ihpRNA轉基因系。還有科學家也根據Gateway技術開發了一種專門針對水稻基因組功能分析的RNA干擾載體-pANDA。還有用于高通量植物功能基因組構建的載體系列,包括適合組成型表達、誘導型異常表達的GUSGFP融合蛋白雙元載體,和以煙草花葉病毒為基礎構建的高通量VICS載體系列。

 


主站蜘蛛池模板: 亚洲伊人久久精品酒店| 亚洲国产精品久久久久爰色欲| 欧美一夜爽爽爽爽爽爽| 免费无码av片在线观看| 一本天堂v无码亚洲道久久| 人妻熟女一区二区aⅴ水野朝阳| 青青热久免费精品视频| 久久中文字幕无码专区| 欧美人与动人物牲交免费观看久久 | 国产高清不卡无码视频| 成+人+网+站+免费观看| 精品亚洲aⅴ在线无码播放| 国产一区二区三区美女| 久久精品中文字幕| 久久综合给合久久狠狠狠97色69| 亚洲aⅴ在线无码播放毛片一线天 吃奶摸下高潮60分钟免费视频 | 超薄丝袜足j好爽在线| 51国偷自产一区二区三区| 日韩av无码一区二区三区| 国产清纯在线一区二区www| 成人夜色视频网站在线观看| 亚洲国产欧美在线人成app| 国产精品极品美女自在线观看免费| www国产内插视频| 西西444www大胆无码视频| 天天天狠天天碰天天爱| 丰满女人又爽又紧又丰满| 国产日产欧产精品精品蜜芽| 色偷偷亚洲精品一区二区| 农村乱人伦一区二区| 国产精品久久久久久久久ktv| 国产精品久久久久久久久动漫| 亚洲mv国产mv在线mv综合试看 | 亚洲日韩久热中文字幕| 国产偷窥熟精品视频| 男ji大巴进入女人的直播| 国产成人精品无码专区| 久久久久蜜桃精品成人片| 精品性影院一区二区三区内射 | 亚洲 欧美日韩 综合 国产| 又色又爽又黄的吃奶视频免费观看|