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Nat Materials: 新型RNAi傳遞系統(tǒng)

日期:2012-02-29 08:35:00

RNA 干擾RNA interferenceRNAi)是指通過(guò)反義RNA與正鏈RNA形成雙鏈RNA特異性抑制靶基因的轉(zhuǎn)錄后表達(dá)的現(xiàn)象,它通過(guò)人為地引入與內(nèi)源性靶基因具有相同序列的雙鏈 RNA,誘導(dǎo)內(nèi)源靶基因的mRNA降解,改變?nèi)旧|(zhì)的結(jié)構(gòu),達(dá)到關(guān)閉相應(yīng)序列基因表達(dá)或使其沉默的目的。

 

RNA干擾(RNAi)技術(shù)的出現(xiàn)讓科學(xué)家們掌握了一種人為控制基因表達(dá)的手段,也因此RNAi發(fā)現(xiàn)者獲得了2006年諾獎(jiǎng)。這一技術(shù)改變了許多領(lǐng)域研究的面貌,癌癥疾病的研究就是其中之一。在過(guò)去的10年里,科學(xué)家們一直致力于利用RNAi技術(shù)開展靶向癌癥治療研究。然而,長(zhǎng)期以來(lái)面臨的一個(gè)重大挑戰(zhàn)就是:缺乏一種有效傳遞RNA的系統(tǒng)。

 

大多數(shù)時(shí)候,短干擾RNA(siRNA)——一種在RNAi通道中的起中心作用的小RNA分子——會(huì)被機(jī)體內(nèi)防御RNA病毒感染的酶快速降解。

 

“嘗試設(shè)計(jì)出能夠?qū)?/SPAN>siRNA的傳送系統(tǒng)無(wú)異于一場(chǎng)戰(zhàn)斗,尤其是我們希望其能靶向身體的特定部位,”麻省理工學(xué)院工程學(xué)教授Paula Hammond說(shuō)。

 

現(xiàn)在Hammond和她的同事們開發(fā)出了一種新型的傳遞系統(tǒng),利用這一系統(tǒng)可將RNA緊密裝入到微球體中,保護(hù)這些RNA在到達(dá)目的地之前都不會(huì)被降解。研究人員證實(shí)新系統(tǒng)敲除特異基因表達(dá)的效力與當(dāng)前常用的傳遞方法相當(dāng),所需要的微粒量卻小得多。研究人員在226日的《自然材料》(Nature Materials)雜志上詳細(xì)地描述了這一系統(tǒng)。

 

Hammond說(shuō):“這一系統(tǒng)不僅為治療癌癥提供了新途徑,而且還適用于由‘異常基因’導(dǎo)致的其他慢性疾病。RNAi為治療包括癌癥、神經(jīng)性障礙和免疫疾病等在內(nèi)多種疾病帶來(lái)了巨大的希望。”

 

長(zhǎng)期以來(lái),科學(xué)家們都致力于開發(fā)多種途徑,希望能人為重現(xiàn)RNAi靶向特異基因這一過(guò)程。其中一種方法就是將siRNA裝入到由脂質(zhì)或無(wú)機(jī)材料構(gòu)成的納米顆粒中。盡管取得了一些成功,然而其中一個(gè)重大的障礙就是無(wú)法緊密壓縮這些短鏈RNA,因此很難將大量的siRNA裝載到那些載體上。

 

為了解決這一難題,Hammond研究小組采用了一種稱為滾環(huán)轉(zhuǎn)錄的RNA合成新技術(shù),合成出了一條由21個(gè)核苷酸重復(fù)串聯(lián)形成的極長(zhǎng)鏈RNARNA長(zhǎng)鏈合成的過(guò)程中,可以同時(shí)折疊,自組裝到微小的、緊密的球體中。多達(dá)50萬(wàn)拷貝的RNA序列可以被壓縮到直徑僅為2微米的球體里。在球體組裝完成后,研究人員再在其表面包裹一層帶正電的聚合物,幫助球體進(jìn)一步壓縮,并進(jìn)入到細(xì)胞中。在微球進(jìn)入到細(xì)胞后,再利用Dicer酶將長(zhǎng)鏈的RNA裂解成siRNA核苷酸片段。

 

肯塔基大學(xué)NIH納米醫(yī)學(xué)研發(fā)中心主任表示該研究最讓人感到興奮的是Hammond開發(fā)了一種RNA微粒自組裝技術(shù),這使得這些微粒能夠縮小到接近50納米,從而使進(jìn)入細(xì)胞的效率大大增高。

 

在這篇文章中,研究人員還利用這一系統(tǒng)敲除小鼠中的特異性基因成功地抑制了腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng),其基因敲除效力與常規(guī)的納米傳遞系統(tǒng)相當(dāng),然而納米數(shù)量卻減少到了1/1000.

 

研究人員表示在后續(xù)的研究中,他們將進(jìn)一步改善這一系統(tǒng)用于特異性靶向腫瘤細(xì)胞或其他疾病細(xì)胞。他們同時(shí)也在開展DNA傳遞系統(tǒng)研究,以期未來(lái)有潛力應(yīng)用到基因治療中去。

 


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