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多細胞因子檢測的新工具

日期:2011-05-12 08:20:04

Mosaic™ ELISA是R&D systems推出的一種96孔微孔板,其中每孔含有多達8種抗體,能同時檢測多種分析物。為計算樣品濃度,Mosaic ELISA試劑盒中還包含了純化的分析物標準品。

Mosaic ELISA也是采用了夾心法ELISA技術(shù),但能同時檢測細胞培養(yǎng)上清、血清或血漿樣品中的最多8種分析物。板中每個孔預(yù)先包被了多個捕獲抗體。將樣本加入孔中,目標分析物與特異的捕獲抗體結(jié)合。隨后加入生物素檢測抗體,辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素以及化學發(fā)光底物試劑,以生成分析物特異的信號,此信號與單個捕獲抗體所結(jié)合的分析物數(shù)量成正比。平板可利用幾種常用的化學發(fā)光成像系統(tǒng)來讀取。

目前,R&D systems推出了兩個試劑盒。Mosaic ELISA Human Cytokine Panel 1包含了特異識別CD40L、IFN-γ、IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-17和TNF-α的的抗體。Mosaic ELISA Human Growth Factor Panel 1則包含了bFGF、PDGF-BB、G-CSF、plGF、HGF和VEGF這六種生長因子的抗體。

Mosaic ELISA將常規(guī)的雙位點夾心免疫法的特異性與多重分析物圖譜分析的高通量性能相結(jié)合,成為一種極佳的替代方法,而無需開展多個傳統(tǒng)的ELISA實驗。

Mosaic ELISA 試劑盒的特點:
  • 96孔板形式
  • 每孔最多8個分析物
  • 320個數(shù)據(jù)點
  • 樣本體積小
  • 分析時間4.5小時

利用Mosaic ELISA Human Cytokine Panel同時檢測多個分析物。按照規(guī)定次數(shù)用PHA處理人類外周血單核細胞(PBMC)。去除細胞培養(yǎng)上清等份,利用Mosaic ELISA Human Cytokine Panel 1同時定量8個不同的細胞因子水平。A. 孔示意圖顯示出可用Mosaic ELISA Human Cytokine Panel檢測的分析物點的位置。參考點(RS)提供了強的陽性信號,可輕松觀察到孔的位置,并在數(shù)據(jù)分析中用于點比對。B. 標準曲線中每孔以及PHA處理的PBMC上清的代表性圖像。PBMC上清按1:64稀釋,確保所有分析物的值落在標準曲線內(nèi)。C. 通過分析每孔中IL-6點的平均點像素密度產(chǎn)生的IL-6直方數(shù)據(jù)圖(B中圈出的)。

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