避免細胞培養中污染的小技巧
日期:2010-08-17 14:05:37
細胞培養對細胞工程,基因工程以及胚胎工程等生物工程研究非常重要。其在培養過程中非常容易污染,嚴重影響了實驗的進程。
方法改進:為了減少細胞培養過程污染的概率,特做如下小小改進: 為保證傳代培養的正常進行不被污染,整個試驗過程都要求無菌意識,換液或傳代消化細胞時,培養皿蓋始終不能離開培養皿,只要滿足操作即可。為避免或減少細胞污染幾率,放入培養箱預平衡的培養液至少有3瓶,同批次細胞盡量使用不同培養瓶內液體,培養24 h后觀察以確保液體無污染。不同批次培養液最好交叉使用3-5 d,以防配制的新液體存在污染,并且新配制的培養液提前放入培養箱預平衡至少24 h,確認無污染后再使用。細胞傳代培養過程中要定時在顯微鏡下觀察,一旦發現培養皿內液體渾濁或呈現黃色(主要是細菌污染)、有葡萄串狀黑色團絮、樹枝狀,管狀或線團狀物質(主要是真菌污染)以及大量細胞碎片等表明細胞污染,應及時采取措施處理或丟棄,以防污染其它正常細胞,造成交叉污染。另外,每次換液前均應在燈光下輕輕搖動培養瓶,仔細觀察培養瓶內培養液,如發現培養液渾濁或有絮狀漂浮物等均應丟棄。
結果:經過多次細胞培養,均可以獲得成功!并且本人培養的細胞已經順利傳到60代以上,沒有見污染現象!
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