
生物素蛋白
1. 什么是生物素化蛋白質?
生物素化蛋白質是一類蛋白質,其中氨基酸或糖基部分通過化學或酶法與生物素分子共價結合。
2. 為什么蛋白質需要進行生物素化?
生物素在分子生物學和生物技術中廣泛用作蛋白質或抗體的結合物。它是由植物和許多原核生物產生的小型水溶性分子。生物素和鏈霉親和素或鳥苷酸的結合是已知非共價生物相互作用中最強的之一。重組或純化蛋白質的生物素化將生物素的生化特性引入目標蛋白質中,而不干擾原始蛋白質本身的特性。除了生物素與鏈霉親和素結合的親和性強外,其相對較小的大小和易于衍生化的戊二酰側鏈使其非常適合標記蛋白質。
3. 蛋白質如何生物素化?
蛋白質可以通過酶法或化學法進行生物素化。蛋白質的化學生物素化可以在體外用化學試劑實現,這使得生物素可以與蛋白質上的任何反應性功能基團共價耦合。然而,化學生物素化缺乏重復性,并且因蛋白質之間反應性功能基團的可用性而有所不同。添加的生物素數量不一致,并且生物素與目標蛋白質的結合是不可控的。而且,某些賴氨酸殘基的修飾可能導致結合位點失活。
華美生物的生物素化蛋白質是通過酶法制備的。Avi-tag是一個由15個氨基酸組成的小肽序列,融合在感興趣的蛋白質的N端或C端。在融合表達后,帶有Avitag的蛋白質可以在體內或體外通過生物素蛋白連接酶(BPL)與賴氨酸殘基結合,從而實現蛋白質的生物素化。基于Avitag技術的蛋白質生物素化確保生物素僅發生在Avitag的賴氨酸殘基上,并且不影響目標蛋白質的自然結合活性。
4. 生物素化蛋白質有什么用途?
任何生物素化蛋白質都可以與蛋白質結合的卵清蛋白親和素和真菌蛋白鏈霉親和素緊密結合。用生物素標記重組或純化的蛋白質可用于蛋白質的捕獲、純化、固定和功能化,以及多聚化或橋聯分子。生物素化蛋白質可以通過鏈霉親和素包被的柱或珠子進行簡單純化。
生物素化蛋白質常常與鏈霉親和素結合物一起在許多蛋白質研究應用中進行檢測或純化,包括酶聯免疫吸附測定(ELISA)、蛋白質印跡(Western blot)分析、免疫組化(IHC)、免疫共沉淀(IP)以及其他親和純化、細胞表面標記和流式細胞儀/熒光激活細胞分選(FACS)等方法。
華美生物的生物素化蛋白質已經進行了預標記和實驗驗證。它們的活性高,純度高,批間變異性低,并且具有優異的檢測靈敏度。以下是一些生物素化蛋白質的列表:
Recombinant Human CD44, partial, Biotinylated (Active) (CSB-MP004938HU(F1)j1-B)
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(tris -甘氨酸凝膠)不連續SDS-PAGE(還原),5%富集凝膠和15%分離凝膠。
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通過酶聯免疫吸附測定其結合能力。2 μg/ml的固定抗CD44小鼠單克隆抗體(CSB-MA004938A0m)能與生物素化的人CD44結合,EC50為2.865 ~ 5.099 ng/ml。
Recombinant HumanTNFSF14, partial, Biotinylated (Active) (CSB-MP023991HUj7-B)

(tris -甘氨酸凝膠)不連續SDS-PAGE(還原),5%富集凝膠和15%分離凝膠。

通過酶聯免疫吸附測定其結合能力。固定的人TNFRSF14(CSB-MP842173HU)在5 μg/ml時能與生物素化的人TNFRSF14結合,EC50為1.773 ~ 3.707 ng/ml。
Recombinant Human GHR, partial, Biotinylated (Active) (CSB-MP009411HUj1-B)

(tris -甘氨酸凝膠)不連續SDS-PAGE(還原),5%富集凝膠和15%分離凝膠。

通過酶聯免疫吸附測定其結合能力。10 μg/ml的固定化KLRK1(CSB-MP012474HU1)能與人生物素化ULBP1結合,EC50為4.254 ~ 7.295 ng/ml。
Recombinant Human GHR, partial, Biotinylated (Active) (CSB-MP009411HUj1-B)

(tris -甘氨酸凝膠)不連續SDS-PAGE(還原),5%富集凝膠和15%分離凝膠。

通過酶聯免疫吸附測定其結合能力。10 μg/ml的固定化KLRK1(CSB-MP012474HU1)能與人生物素化ULBP1結合,EC50為4.254 ~ 7.295 ng/ml。
Recombinant Human TNFSF13B, partial (Active) (CSB-MP897523HU1-B)

(tris -甘氨酸凝膠)不連續SDS-PAGE(還原),5%富集凝膠和15%分離凝膠。

通過酶聯免疫吸附測定其結合能力。10 μg/ml的固定化人BCMA(CSB-MP023974HU1)能與人生物素化TNFSF13B結合,EC50為0.1752-0.3657 ng/ml。
所有生物素化蛋白
基因名稱 | 貨號 | 產品名稱 | 來源 | 標簽 |
---|---|---|---|---|
ACE2 | CSB-MP866317HU-B | Recombinant Human Angiotensin-converting enzyme 2(ACE2),partial,Biotinylated (Active) | 哺乳動物細胞 | C-terminal mFc-Avi-tagged |
CD44 | CSB-MP004938HU(F1)j1-B | Recombinant Human CD44 antigen(CD44), partial, Biotinylated | 哺乳動物細胞 | C-terminal mFc-Avi-tagged |
TNFSF14 | CSB-MP023991HUj7-B | Recombinant Human Tumor necrosis factor ligand superfamily member 14(TNFSF14), partial, Biotinylated | 哺乳動物細胞 | N-terminal hFc-Avi-tagged |
GHR | CSB-MP009411HUj1-B | Recombinant Human Growth hormone receptor(GHR), partial, Biotinylated | 哺乳動物細胞 | C-terminal mFc-Avi-tagged |
ULBP1 | CSB-MP887177HUj1-B | Recombinant Human UL16-binding protein 1(ULBP1), Biotinylated | 哺乳動物細胞 | C-terminal mFc-Avi-tagged |
TNFSF13B | CSB-MP897523HU1-B | Recombinant Human Tumor necrosis factor ligand superfamily member 13B(TNFSF13B), partial, Biotinylated | 哺乳動物細胞 | N-terminal hFc-Avi-tagged |