Your Good Partner in Biology Research

蛋白質控

華美生物所有蛋白產品都會經過嚴格的質量控制,包括蛋白質的濃度測定、純度測定、分子量檢測、內毒素檢測、蛋白質活性檢等。蛋白質質量控制的流程圖如下:

1. 蛋白濃度測定

蛋白質濃度檢測的方法有bradford法、BCA法、A280法,根據緩沖成本選擇合的檢測方法,其中最常用的為bradford法,濃度檢測的范圍為1-5mg/ml。Bradford法標準曲線如下圖所示:

2. 蛋白分子量檢測

蛋白質分子量檢測采用考馬斯亮藍顯色結合SDS-PAGE檢測,分子質量跟氨基酸序列推測的理論分子質量一致。重組小鼠 Calreticulin(Calr)蛋白理論分子質量為73.3KD,其檢測結果如下:

3. 蛋白質純度檢測

蛋白質純度檢測采用考馬斯亮藍顯色SDS-PAGE分離蛋白,通過bandscan軟件分析蛋白質的純度,蛋白質的純度需達到90%。

4. 蛋白內毒素檢測

內毒素檢測采用 LAL方法,內毒素含量低于1 EU / μg。

5. 蛋白質活性檢測

蛋白質活性檢測有ELISA方法,細胞活性檢測,酶活性檢測方法三種方法,其中受體蛋白主要采用ELISA方法,細胞因子類蛋白采用細胞活性檢測法,酶類采用活性檢測方法。

Measured by its binding ability in a functional ELISA. Immobilized ACKR1 at 1 μg/ml can bind human CCL2, the EC50 of human CCL2 protein is 48.64-60.24 μg/ml.

Measured in a cytotoxicity assay using L 929 mouse fibroblast cells in the presence of the metabolic inhibitor actinomycin D. The ED50 for this effect is 33.32-47.38 pg/ml

6. 測序

蛋白質質譜鑒定是蛋白質組學研究的核心技術之一,是鑒定蛋白質的主要方法。質譜分析可分為兩類:MALDI-TOF和LC-MS / MS,其中,LC-MS / MS具有更高的靈敏度和幾乎100%的可靠性,這是文獻中最常用的方法。目前,從蛋白質樣品混合物中鑒定單一蛋白是蛋白質研究中的一個核心問題。分離蛋白質混合物有兩種常用方法:二維凝膠電泳(2-DE)和聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE,十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳)。

現今,華美生物的蛋白質凝膠條和凝膠點鑒定已經形成了一套成熟的流程,主要包括通過一維或二維電泳獲得目標蛋白條帶和斑點,并連續優化凝膠內酶解方法,然后通過LC-MS / MS分析獲得蛋白質碎裂芯片電荷,峰圖和其他相關信息。該方法可以顯著提高質譜鑒定的成功率和蛋白質凝膠消化中肽的覆蓋率。


主站蜘蛛池模板: 精品香蕉一区二区三区| 亚洲精品久久av无码一区二区| 国产伦人人人人人人性| 99久久超碰中文字幕伊人| 内射合集对白在线| 少妇极品熟妇人妻无码| s级爆乳玩具酱国产vip皮裤 | 日韩免费无码视频一区二区三区| 小13箩利洗澡无码视频网站| 国产成人精品综合久久久| 无码精品国产一区二区三区免费| 重口sm一区二区三区视频| 亚洲日本乱码在线观看| 老熟妇性老熟妇性色| 极品熟妇大蝴蝶20p| 国产综合色产在线精品| 国产午夜福利在线播放87| 国产午夜永久福利视频在线观看 | 亚洲曰本av在线天堂| 日本久久久久久级做爰片| 丁香五月欧美成人| 天天干天天日| 国精品人妻无码一区二区三区蜜柚| 成人做受120秒试看试看视频| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 亚洲小说区图片区另类春色| 亚洲日韩看片成人无码| 久久国产福利国产秒拍飘飘网| 国产成人精品日本亚洲第一区 | 欧美成人精品三级网站视频| 亚洲卡一卡二乱码新区仙踪| 无遮挡又黄又刺激的视频| 色天天天综合色天天| 欧美老肥熟妇多毛xxxxx| 国产乱子伦60女人的皮视频| 国产精品无码久久av| 欧美日韩国产一区二区三区不卡| 精品无码久久久久国产电影| 拍摄av现场失控高潮数次| 无码精品人妻一区二区三区免费看 | 性少妇中国内射xxxx狠干|