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【華美講堂 第十三期】抗體內化效率檢測利器助力ADC藥物研發

瀏覽次數:308      日期:2024-03-15 14:24:15


主題
  ♦ 抗體內化效率檢測利器助力ADC藥物研發
 
講師
周瀅博士 武漢華美生物 市場部 產品經理
 
    癌癥是全世界的一個主要死因。根據WHO的最新報告,每六名死亡者中就有一人死于癌癥。抗體偶聯藥物(ADCs)是一種新型的抗癌藥物,具有高度特異性和強大的殺傷力。ADC由三個關鍵部分組成:單克隆抗體(mAb)、連接子和有效載荷。單克隆抗體與腫瘤細胞表面的抗原特異性結合后,ADC-抗原復合物經過內化作用被轉運至癌細胞體內,連接子裂解繼而釋放出毒素小分子,造成癌細胞死亡。在此過程中,內化效率是影響ADCs療效的一個關鍵因素。如果抗體內化效率低下,會導致ADC內化不足,則癌細胞體內的毒素小分子也會因為濃度不夠而造成療效降低。

    在ADC的開發中,抗體內化效率的檢測是必要的一個環節,市面上有不同的內化檢測方法供研究者選擇。傳統的檢測方法有pH探針內化檢測和熒光二抗內化檢測,大多基于細胞內外pH變化或是檢測過程中抗體孵育溫度的變化,并且通過熒光信號變化值來檢測抗體的內化水平。其他檢測方法還有基于活細胞成像的實時檢測方法或者基于毒素偶聯的細胞殺傷檢測。

    重組蛋白DT3C屬于基于毒素偶聯類別的細胞殺傷檢測,是繼Mab-ZAP之后檢測抗體內化效率的有效工具,該蛋白包括一個沒有受體結合域的白喉毒素diphtheria toxin (DT) 和鏈球菌蛋白G (Streptococcus protein G) 的C1、C2、C3 (3C)結構域。DT3C替代的是ADC藥物分子中的毒素小分子,抗體和DT3C偶聯之后可模擬ADC藥物進入細胞體內,造成細胞毒性。重組蛋白DT3C是一種簡單方便的工具,可用于體外檢測癌細胞對單克隆抗體的內化效率,進而篩選出更有效的單克隆抗體,助力ADC藥物研發。

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