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ELISA 試劑盒質(zhì)控流程

華美生物嚴(yán)格的生產(chǎn)和質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)是ELISA試劑盒質(zhì)量的根本保障。華美生物ELISA試劑盒的質(zhì)控指標(biāo)包括:供線性范圍,線性,檢測(cè)下限,精度,回收率,穩(wěn)定性和天然樣品檢測(cè)。指標(biāo)詳情如下:

1、線性范圍

通過(guò)線性范圍,我們可以計(jì)算出待測(cè)試樣本值。下圖為CSB-E07270h(人脂聯(lián)素,ADP ELISA試劑盒)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

ng/ml OD1 OD2 Average Corrected
100 2.839 2.897 2.868 2.718
50 1.968 1.974 1.971 1.821
25 1.144 1.192 1.168 1.018
12.5 0.709 0.733 0.721 0.571
6.25 0.433 0.450 0.441 0.291
3.125 0.303 0.301 0.302 0.152
1.562 0.242 0.223 0.233 0.083
0 0.149 0.151 0.150

2、線性

線性是實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性和特異性的測(cè)試指標(biāo)。為了測(cè)定線性,在基質(zhì)中加入高濃度分析物的樣品并用樣品稀釋液稀釋,生成的產(chǎn)物可在測(cè)定的動(dòng)態(tài)范圍內(nèi)有值,結(jié)果表示為觀察到的百分比。

以CSB-E07270h(人脂聯(lián)素,ADP酶聯(lián)免疫吸附試劑盒)為例:

血清樣品稀釋比分別為:1:100、1:200、1:400和1:800。

細(xì)胞培養(yǎng)物上清液稀釋比分別為1:1、1:2、1:4和1:8。

測(cè)試值在80-120%之間并顯示出良好的線性。

Sample Serum(n=4)
1:100 Average( %) 91
Range ( %) 85-97
1:200 Average( %) 97
Range ( %) 91-103
1:400 Average( %) 93
Range ( %) 85-95
1:800 Average( %) 95
Range ( %) 90-100
Sample Cell Culture Supernates(n=4)
1:1 Average( %) 97
Range ( %) 80-100
1:2 Average( %) 95
Range ( %) 91-110
1:4 Average( %) 90
Range ( %) 85-95
1:8 Average( %) 96
Range ( %) 90-100

3、檢測(cè)下限

檢測(cè)下限是靈敏度檢測(cè)指標(biāo)。檢測(cè)下限越低,靈敏度越高。

4、精度

精度是重復(fù)性的檢測(cè)指標(biāo),是從平均值中測(cè)量的變異系數(shù)(CV)。 精度越高,重復(fù)性越好。 常考慮的精度有兩種:批內(nèi)精度和批間精度。

批內(nèi)精度:批內(nèi)精度是測(cè)定中孔之間的可重復(fù)性。在一個(gè)平板上反復(fù)檢測(cè)三個(gè)已知濃度的樣品達(dá)二十次來(lái)評(píng)估CSB-E07270h(人脂連蛋白,ADP ELISA試劑盒)的精確度:CV%<8%。

批間精度:批間精度是分析不同批次間的可重復(fù)性。 在20批次中,檢測(cè)三個(gè)已知濃度的樣品以評(píng)估CSB-E07270h(人脂聯(lián)素,ADP ELISA試劑盒)的精確度:CV%<10%。

Intra-Assay Precision Inter-Assay Precision
Sample 1 2 3 1 2 3
n 20 20 20 20 20 20
Mean(ng/ml) 13.215 12.894 13.438 12.897 13.109 12.963
SD 0.63 0.37 0.53 1.10 0.81 1.00
CV(%) 4.75 2.847 3.931 8.562 6.145 7.741

5、回收率

回收率是實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性和特異性的檢測(cè)指標(biāo),它反映了樣品分析過(guò)程中分析物的損失程度。 回收率越高,精度越高。

華美生物試劑盒,在各種基質(zhì)中,分析物的回收率在整個(gè)測(cè)定范圍內(nèi)都達(dá)到了很高的水平。

下圖為CSB-E07270h(人脂連蛋白,ADP ELISA試劑盒)的回收率:

Sample Type Average(%) Range(%)
Serum (n=5) 95 89-98
EDTA plasma (n=4) 97 90-100

6、試劑盒組分穩(wěn)定

一般來(lái)說(shuō),穩(wěn)定性越好,存儲(chǔ)時(shí)間越長(zhǎng)。試劑盒組分穩(wěn)定性檢測(cè):將華美生物ELISA試劑盒的主要原料和測(cè)定板置于37℃下熱損傷測(cè)試7天,然后再與4℃下儲(chǔ)存的原料進(jìn)行比較。若是7天后,原料OD值≤30%,即為合格產(chǎn)品。

7、特異性

特異性是ELISA試劑盒質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo)。華美生物ELISA試劑盒均選用高特異性原料,以確保ELISA試劑盒的特異性。另外,研發(fā)團(tuán)隊(duì)會(huì)進(jìn)一步分析試劑盒的交叉反應(yīng),進(jìn)一步確認(rèn)該試劑盒能且只能識(shí)別和檢測(cè)目的分析物。

8、天然樣品檢測(cè)

天然樣品檢測(cè)對(duì)于ELISA試劑盒的推廣至關(guān)重要。 華美生物ELISA試劑盒可以檢測(cè)自然樣品,樣品值均可供用戶參考。 對(duì)于CSB-E07270h(人脂聯(lián)素,ADP ELISA試劑盒),我們?cè)谥耙?:500稀釋度測(cè)試血清和血漿樣品,測(cè)試值為S3-S5。


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